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张小逸

铜虫 (小有名气)

[求助] 求助高手RAPD的问题

本人新手,最近做RAPD实验,看了很多文献,其中基本提到的用的都是Taq
酶,Mgcl2,等分别加进去,本人想知道是否可用Mix加,这样可能会比较方便,因为RAPD这个实验的量比较大,谢谢!
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 热心! 2011-11-07 21:55:33
看看前人发的一个经验贴吧,里面提到这个问题:
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1707043
2楼2011-11-07 17:00:47
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

可以!
但镁离子与buffer分开的好优化条件!
真相是最大的奢侈品
3楼2011-11-07 21:55:23
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betyyang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果你的体系已经优化好了,就可以用Mix,否则还是先优化体系,包括Mg2+、引物和dNTP的量,尤其Mg2+在RAPD的PCR操作中还是很重要的。
4楼2011-11-08 11:39:46
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张小逸

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by betyyang at 2011-11-08 11:39:46:
如果你的体系已经优化好了,就可以用Mix,否则还是先优化体系,包括Mg2+、引物和dNTP的量,尤其Mg2+在RAPD的PCR操作中还是很重要的。

MIX中Mg2+/dNTP的量不是已近确定了吗?怎样去调整MIX中的量呢?本人研一,刚做这个不是很懂,谢谢!
5楼2011-11-13 09:46:33
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