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junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生

引用回帖:
10楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-07 16:47:18:
那有可能是你的液体培养基有问题,氨苄失效了,长起来的是杂菌。你在液体培养基里摇了多久才长起来?超过12小时才开始变浑浊的话肯定有问题了。
试试拿新加了氨苄的培养基来摇看看,如果是杂菌应该长不起来的。

板里也加一样的氨苄啊,能提出一点质粒来,我还是在转化一下吧
寻找方向,前进
11楼2011-11-09 13:10:29
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麻花13

新虫 (小有名气)

会不会是细菌本身的问题?
我以前一直没有注意到,提质粒最好是在平台期的时候提,而是按说明书,摇菌到16小时候提,结果有的时候,菌液会出现絮状沉淀(在后面的实验种,惊奇的发现,出现絮状沉淀后,菌液的OD600值反而下降了,估计是死菌的积聚吧),后来,尝试在适当时间开始测菌液OD600值,当发现其上升速率变慢,或者几乎不上升时,开始提质粒,结果好一点点(但是,在细菌层面,感觉主要因素还是细菌克隆质粒的活性,太老的菌,效果就不会好)
12楼2011-11-21 08:09:56
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junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生

引用回帖:
12楼: Originally posted by 麻花13 at 2011-11-21 08:09:56:
会不会是细菌本身的问题?
我以前一直没有注意到,提质粒最好是在平台期的时候提,而是按说明书,摇菌到16小时候提,结果有的时候,菌液会出现絮状沉淀(在后面的实验种,惊奇的发现,出现絮状沉淀后,菌液的OD6 ...

是吗?最近还是提不好,第一不离心,倒上清时,就发现,离心离得不实,菌总能被倒出来,难道是摇过啦?
寻找方向,前进
13楼2011-11-21 09:23:47
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