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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒怎么会提不出来'?
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junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生
引用回帖:
10楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-11-07 16:47:18:
那有可能是你的液体培养基有问题，氨苄失效了，长起来的是杂菌。你在液体培养基里摇了多久才长起来？超过12小时才开始变浑浊的话肯定有问题了。
试试拿新加了氨苄的培养基来摇看看，如果是杂菌应该长不起来的。

板里也加一样的氨苄啊，能提出一点质粒来，我还是在转化一下吧
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11楼2011-11-09 13:10:29
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麻花13

新虫 (小有名气)
会不会是细菌本身的问题？
我以前一直没有注意到，提质粒最好是在平台期的时候提，而是按说明书，摇菌到16小时候提，结果有的时候，菌液会出现絮状沉淀（在后面的实验种，惊奇的发现，出现絮状沉淀后，菌液的OD600值反而下降了，估计是死菌的积聚吧），后来，尝试在适当时间开始测菌液OD600值，当发现其上升速率变慢，或者几乎不上升时，开始提质粒，结果好一点点（但是，在细菌层面，感觉主要因素还是细菌克隆质粒的活性，太老的菌，效果就不会好）
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12楼2011-11-21 08:09:56
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junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生
引用回帖:
12楼: Originally posted by 麻花13 at 2011-11-21 08:09:56:
会不会是细菌本身的问题？
我以前一直没有注意到，提质粒最好是在平台期的时候提，而是按说明书，摇菌到16小时候提，结果有的时候，菌液会出现絮状沉淀（在后面的实验种，惊奇的发现，出现絮状沉淀后，菌液的OD6 ...

是吗？最近还是提不好，第一不离心，倒上清时，就发现，离心离得不实，菌总能被倒出来，难道是摇过啦？
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寻找方向，前进
13楼2011-11-21 09:23:47
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