应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒怎么会提不出来'?
52/1返回列表
查看: 1840  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生

[求助] 质粒怎么会提不出来'?

用试剂盒小提质粒时，从来没遇到过的现象：加完buffer2混匀，有些不清楚，以为正常，加完3混匀，不是明显的白色沉淀，而是整体的蛋白胶状物，离心12000rpm，10分钟，没离下东西，只是有透明丝状物
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
寻找方向，前进
1楼 2011-11-03 21:10:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junxiao0320

金虫 (小有名气)

学生
引用回帖:
12楼: Originally posted by 麻花13 at 2011-11-21 08:09:56:
会不会是细菌本身的问题？
我以前一直没有注意到，提质粒最好是在平台期的时候提，而是按说明书，摇菌到16小时候提，结果有的时候，菌液会出现絮状沉淀（在后面的实验种，惊奇的发现，出现絮状沉淀后，菌液的OD6 ...

是吗？最近还是提不好，第一不离心，倒上清时，就发现，离心离得不实，菌总能被倒出来，难道是摇过啦？
赞一下 回复此楼
寻找方向，前进
13楼2011-11-21 09:23:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

王玉民

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

junxiao0320(金币+1): 2011-11-04 08:21:29
junxiao0320(金币+1): 2011-11-04 08:21:48
junxiao0320(金币+1): 2011-11-05 18:48:01
试剂盒用久了吧，那个buffer2是氢氧化钠和SDS，开口时间长了与空气中的二氧化碳反应了，也可能是3有问题了。换换试剂盒试试。要不就是菌不对。
赞一下 回复此楼
心晴
2楼2011-11-03 21:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子
细菌本身的问题吧
赞一下 回复此楼
开开心心做科研，踏踏实实做好人。
3楼2011-11-03 22:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
加完Buffer 2不澄清可能有以下原因，
1.buffer 2失效，但一般plasmid kit 保持期有1年，除非你kit太久，否则此可能性不大。
2.菌的问题。可能你养的菌有杂菌也会出现buffer 2不澄清的情况。
（另外，你buffer 1 2 3加时没搞错吧？）

你可以同时做一个确定没问题的菌(即我们常说的对照)来排除是kit还是你菌的问题。
赞一下 回复此楼
伟大航线....
4楼2011-11-04 09:28:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭