24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3712)
>虫友互识 (704)
>文献求助 (252)
>导师招生 (230)
>论文投稿 (136)
>考博 (98)
>硕博家园 (96)
>教师之家 (71)
>基金申请 (69)
>博后之家 (58)
>休闲灌水 (51)
>考研 (49)
>公派出国 (47)
>招聘信息布告栏 (40)
>找工作 (34)
>论文道贺祈福 (33)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

要学药学

资料

» 猜你喜欢

救命帖已经有7人回复
限项规定已经有6人回复
西南交通大学国家级人才团队2026年博士研究生招生（考核制）—机械、材料、力学方向已经有3人回复
英文综述是否需要润色及查重已经有5人回复
为什么nbs上溴没有产物点出现呢已经有9人回复
招博士已经有3人回复
最失望的一年已经有18人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2011-11-03 18:03:57

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hanhedong

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 453.4
红花: 1
帖子: 24
在线: 17.1小时
虫号: 1404040
注册: 2011-09-16
性别: GG
专业: 药物化学

【答案】应助回帖

★
renruntan(金币+5): 谢谢真的很谢谢 2011-11-05 09:39:52
renruntan: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-04-06 09:50:35

梯度洗脱一般是确定样品中初成分的出峰情况，从而确定更好的分离条件。
加乙酸或者三乙胺，主要用在硅胶柱的系统中
在硅胶柱的填料键合硅胶上有硅羟基，加乙酸或者三乙胺主要就是抑制硅羟基的作用，防止峰拖尾
被测物质显酸性，则加乙酸
被测物质显碱性，则加三乙胺
甲醇和乙腈的不同：
1.吸光度：乙腈HPLC吸收最小（特别是在短波长上小）。所谓HPLC级是除去具有吸收UV的杂质，在规定的波长上吸光度限制在规格值以内。在UV检测时，产生的噪声小，因此在进行UV短波长上的高灵敏度分析时乙腈HPLC级最适宜。另外，在UV检测中的梯度基线上也是乙腈HPLC级产生鬼峰少，虽然，其他与水相溶性高的有机溶剂有各种各样，但很难能找到比乙腈HPLC级吸收更小的。
2.压力：乙腈低。根据有机溶剂的种类或混合比率的不同而异,水/乙腈,水/甲醇混合液的比率与输液压力的关系中,甲醇与水混合,压力增高,而乙腈同样与水混合且并不如此.所以,乙腈一方,在同样的流速下不在柱内加上多余的压力.从上述两项,可以确认使用乙腈的意义,那么,甲醇除了价格以外,还有没有其化优点呢?
3.洗脱能力：一般而言,乙腈较强.乙腈和甲醇分别用同样的比率与水混合时,一般情况下,乙腈的洗脱能力强.特别是混合比率低时,从咖啡因和苯酚的洗脱来看,获得同样的保留时间,乙腈的比率,只需甲醇的比率的一半以下即可.另一方面,有机溶剂100%或与此极接近时,从胡萝卜素和胆甾醇来看,常常都是甲醇的洗脱能力强.混合比在50比1等较为特殊时,调制的误差大,影响保留时间,或平衡化的时间长,乙腈遇到这种情况时,用甲醇的10比1混合代替乙腈,这样操作方便些.溶剂受温度影响时,不采用容器定量,而采用重量的方法(考虑比重),可使混合比的误差减小.
4.分离(洗脱)的选择性.两者的差异：乙腈和甲醇在分离的选择性上不同.由于有机溶剂分子的化学性质(甲醇和乙醇是质子性,乙腈和四氢呋喃是非质子性)不同所致.因此,在用乙腈类不能获得分离的选择性,就试用甲醇类看看.
5.峰形：用时出现差异.像水杨酸化合物(在邻位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等,用乙腈类时拖尾大,用甲醇类可抑制.可是,一般情况下,聚合物类反相柱,与硅胶柱相比,更具有峰形宽的倾向,特别是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等时常见.这在流动相是甲醇时非常显著,而用乙腈时不明显.为此,用聚合物类反相用柱时建议采用后者(乙腈类),这是因为乙腈使凝胶膨润.
6.流动相的脱气：甲醇与水混合时发热,多余的溶解空气较易变为脱出气泡(脱气容易).而乙腈由于吸热冷却,随着慢慢回到室温,产生气泡,所以要考虑脱气(加温搅拌,过滤膜,He脱气等).
结论：以上反相色谱法流动相常用的乙腈和甲醇进行了比较.粗略地讲是,使用乙腈HPLC级最好,在选择性,峰形差时试用甲醇HPLC,但根据各种不用性质设计分析条件也是必要的。