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bubingwu

新虫 (小有名气)

[求助] 怎样得到棉花悬浮细胞

请教各位:
    本人想得到棉花的悬浮细胞,现在已经从棉花无菌苗截取了下胚轴在1/2MS培养基上培养了,不知道以后怎么操作,比如隔多长时间换培养基,大约换多少次就可以做悬浮?具体步骤,急求………………
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bubingwu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cxbmh at 2011-10-27 17:50:44:
从无菌苗下胚轴切段诱导愈伤组织。无菌苗的制备、 愈伤组织的诱导及胚性愈伤组织的获得参照吴家和(棉花体细胞增殖和胚胎发生中的细胞程序性死亡[J ])的方法进行
从固体培养基上挑选 4~6 g 不同状态的胚性愈伤置 ...

好的,谢了啊,马上去试验
3楼2011-10-27 23:15:04
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cxbmh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2011-10-27 20:51:25
从无菌苗下胚轴切段诱导愈伤组织。无菌苗的制备、 愈伤组织的诱导及胚性愈伤组织的获得参照吴家和(棉花体细胞增殖和胚胎发生中的细胞程序性死亡[J ])的方法进行
从固体培养基上挑选 4~6 g 不同状态的胚性愈伤置于100 ml 三角瓶 ,加入 40 ml MS 液体培养基,在水平摇床上悬浮振荡培养。摇床速率 120 r· min21,培养温度(28 ±1) ℃,每天 12 h 光照。以后 ,每隔13 d取10 ml 悬浮细胞到盛有 30 ml 新鲜MS液体培养基的三角瓶中继代悬浮培养。
2楼2011-10-27 17:50:44
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cxbmh

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
jhu132llh(金币+1): good,感谢积极应助 2011-10-28 17:09:35
因为没有任何抗生素 所要用的东西要灭菌,超净台的洁净度要达到无菌操作的级别
还有你知道无菌操作...........
祝好
4楼2011-10-28 11:18:52
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