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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 作物 » 重金急求，甲苯测定脯氨酸问题，困扰了两天了！！！！！！！！！！！！
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qshlyt

银虫 (小有名气)

[求助] 重金急求，甲苯测定脯氨酸问题，困扰了两天了！！！！！！！！！！！！

近来在做甲苯测定脯氨酸含量，可是怎么也萃取不出来。具体步骤如下，希望能得到大家的帮助：
酸性茚三酮：1.25g溶于60冰醋酸与40 6M磷酸。
取棉花叶片0.3g,剪碎于试管中，5毫升3%磺基水杨酸，沸水浴10分钟，冷却，过滤，取滤液2毫升，加2毫升冰醋酸、2毫升酸性茚三酮，沸水浴30分钟，冷却后，加5毫升甲苯，振荡，萃取。
问题是：怎么也不能将色素萃取到甲苯层，色素始终在下层。

诚求，大侠帮忙。试验已经重复了4次了，始终找不到原因。

[ Last edited by 缺友情 on 2011-10-25 at 23:21 ]
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1楼 2011-10-25 22:55:24
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qixs2011

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 感谢交流~ 2011-10-26 23:49:03
qshlyt(金币+1): 2011-10-27 09:40:02
0.3g换成0.5克，剪碎换成磨碎。
酸性茚三酮现配现用。
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2楼2011-10-26 09:15:13
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99320710

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
木虫/panda(金币+2): 感谢交流~ 2011-10-26 23:48:48
qshlyt(金币+2): 感谢交流 2011-10-27 09:42:45
首先茚三酮要现配现用，其次水杨酸萃取的时候要不断的摇动以萃取完全，再有配制用的磷酸市售的就是85%无需稀释，你再看看。也可以在加大第二次煮沸时间
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今天的现在都是为了明天的更美好！
3楼2011-10-26 20:36:31
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qshlyt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qixs2011 at 2011-10-26 09:15:13:
0.3g换成0.5克，剪碎换成磨碎。
酸性茚三酮现配现用。

酸性茚三酮是现配现用的。也对所用的试剂做了一一排查，只是没有磨碎，是剪成小的颗粒，另似乎加量没有什么影响吧，
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4楼2011-10-27 09:42:03
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qshlyt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 99320710 at 2011-10-26 20:36:31:
首先茚三酮要现配现用，其次水杨酸萃取的时候要不断的摇动以萃取完全，再有配制用的磷酸市售的就是85%无需稀释，你再看看。也可以在加大第二次煮沸时间

这个第一次是不断摇动的，磷酸我是参考的外文文献，要稀释6M，我煮沸时间到1小时了，也是下层是红色，上层澄清。
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5楼2011-10-27 09:44:48
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小梁子0707

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
缺友情(金币+2): 鼓励新虫交流！欢迎常来农林版！ 2011-10-27 17:33:38
qshlyt(金币+1): 2011-10-28 14:50:47
我也遇到这种情况，楼主做标准曲线了没？有没有红色？我做的标曲也没有颜色。。。。样品的红色也同样在底下，方法跟你用的是一样的
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6楼2011-10-27 14:29:55
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wwccff.1234

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
缺友情(金币+1): 鼓励应助！欢迎常来农林版！ 2011-10-27 17:34:05
qshlyt(金币+1): 0 .xiexie,我也试试 2011-11-02 11:33:07
我做的时候，震荡后就能进入甲苯层了，只是，下层还有点浑浊，而且有两个处理貌似还没提取出来，我取样0.5克，其他基本一样
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7楼2011-10-27 17:25:15
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bingerj

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
木虫/panda(金币+1): 感谢交流~ 2011-10-28 13:17:02
qshlyt(金币+2): 2011-10-28 14:56:07
qshlyt(金币+2): 2011-10-28 14:56:07
建议楼主加2.5g茚三酮试试
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8楼2011-10-28 10:17:29
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qshlyt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小梁子0707 at 2011-10-27 14:29:55:
我也遇到这种情况，楼主做标准曲线了没？有没有红色？我做的标曲也没有颜色。。。。样品的红色也同样在底下，方法跟你用的是一样的

我的标曲能做出来，能萃取，就是在植物中就不行了。最近海在做吗？我的联系方式：379496881
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9楼2011-10-28 14:51:49
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qshlyt

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by bingerj at 2011-10-28 10:17:29:
建议楼主加2.5g茚三酮试试

这个同时磷酸和醋酸也要加量吗？还是增加茚三酮的浓度
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10楼2011-10-28 14:56:44
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