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2140061铜虫 (小有名气)
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pet30a怎么构建C端His-tagged的载体啊？
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| pet30a载体在MCS两端都有His-tagged，怎么构建讲目的蛋白只在C端His-tagged的载体啊？ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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wanhscn(金币+3, MolEPI+1): 根据 2011-10-22 23:50:44
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不是的，你不是只需要C端由his-taq吗？那么连接的时候，上游引物引物引入Nde I酶切位点，这样就可以切掉N端的his-taq。然后下游引物设计的时候需要突变掉终止密码子，这样C端才能保留his-taq，不然基因表达到his-taq之前就终止了。 我觉得你需要把PET30a质粒的物理图谱好好看看。应该可以看懂的。 |
6楼2011-10-22 09:59:53
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8楼2011-10-22 21:55:50
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