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[求助]
求助，银染法背景色严重
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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳跑的蛋白，之后采用银染法进行染色，染色效果重复性很差，偶尔条带清晰，大多数时候整个胶都变褐色了，分不清条带，不知道到底是什么原因，希望有做银染法经验的同学传授一下~~谢谢~~ 这是我做的银染法： 1.水洗3次，5min/次 2.固定：固定液（25ml乙酸，100ml乙醇，加水至250ml）摇浸2h 3.敏华：敏化液（0.5g硫代硫酸钠，17g乙酸钠，75ml乙醇，加水至250ml ）摇浸30min 4.漂洗：250ml双蒸水洗3次，5min/次 5.银染：AgNO3溶液（1.25g/500ml水）中摇浸20min（报纸避光） 6.漂洗：250ml双蒸水洗2次，1min/次 7.显色：显色液（12.5g碳酸钠，200微升甲醛，加水至500ml）显色约2-5min，2次 8.终止：终止液（3.65gEDTA溶于250ml水）摇浸10min 9.漂洗：500ml双蒸水洗2次，10min/次 在这先谢谢大家了~~~做过好多次银染都不算成功，很多时候背景和条带同时变成褐色，希望能找到原因~~~呵呵 |
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