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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 电化学 » 电化学传感器 » 电化学分析中的HRP酶和过氧化氢系统该怎样测试？
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grandstone

铁虫 (小有名气)

[求助] 电化学分析中的HRP酶和过氧化氢系统该怎样测试？

刚开始做，为了检测小分子物质。首先在电极上包被偶联抗原，再加一抗，再加HRP标记的二抗，放入缓冲液中后，再加入过氧化氢。目前有几个问题想请教下高手：
1.缓冲液目前使用的是 pH 7.0 的0.01mol PBS，这个需要调整吗，还是一般都用这个？
2.用循环伏安法测试缓冲液背景电流的时候老是溢出，调整灵敏度也不行，目前只能用差式脉冲来测，这个是为什么呢？
3.把按照之前处理的电极放入缓冲液中后，再加入过氧化氢 ，15分钟后测定，差式脉冲曲线和没有加入过氧化氢之前没有什么差异（-0.5——+0.8），这是为什么呢？

谢谢各位啦!
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1楼 2011-10-16 19:22:23
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zbyymlx998

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我想说一下，第一，你确定你的物质已经修饰好了吗？或是说你确实你修饰上你的抗原或是抗体了吗？如果，你没有接上二抗，所以，你当然加入过氧化氢后没有响应了。所以，这是第三个的问题。还有一班都加电话性物质，你加了吗？我做这个体系用的是计时电流法。然后，对于第一个问题，我感觉PBS应该是可以的。
对于第二个问题，我暂时不是太清楚，在PBS里面做CV图，我的是有响应的，但是电流很小
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2楼2011-10-20 18:01:58
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yuanling123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

3.把按照之前处理的电极放入缓冲液中后，再加入过氧化氢 ，15分钟后测定，差式脉冲曲线和没有加入过氧化氢之前没有什么差异（-0.5——+0.8），这是为什么呢？
还要加入电子媒介体，如硫堇或对二苯酚
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希望结识电化学方面的人才！
3楼2011-10-21 15:38:59
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