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hrjxx

新虫 (小有名气)

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[求助] TCA/丙酮沉淀，蛋白为什么不溶呢？？

大家好，我用0.2%DTT,10%TCA的丙酮溶液沉淀蛋白后，为什么蛋白就是不溶呢？？一直是离心后的那种块状，不能被溶解开啊，大家知道是什么原因吗？？我的裂解液成分是：9M尿素，1%DTT,4%CHAPS,0.2%CA,沉淀后干燥12分钟，室温溶解了6个小时候，还是块状，大家指教下啊!

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1楼2011-10-16 02:32:13

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hrjxx

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 求索寻觅 at 2011-10-17 18:44:55:
我觉得不要用TCA法，我现在直接用7M尿素，2M硫尿的方法，离心35000g（我们实验室达不到40000g或者100000g）4度离心60min，聚焦电压也可以达到7000v，我觉得应该没什么很大问题。
我现在也在做预实验，我的聚焦没 ...

加硫脲的话，有时候会出现条纹，原因不明哦