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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 杯具啊！还原型谷胱甘肽貌似失效了，柱子回收一半了，不知道蛋白还在不在？
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btx362237729

金虫 (正式写手)

[求助] 杯具啊！还原型谷胱甘肽貌似失效了，柱子回收一半了，不知道蛋白还在不在？

查了一下才知道GST elution buffer用到的还原型谷胱甘肽要现用现配啊！！！

为什么没人或者protocol提前告诉

现在柱子回收到了第二步  

用5体积Regeneration buffer1（0.1M Tris   0.5M NaCl  0.1%SDS  pH8.5）洗柱子

然后5体积超纯水洗柱子


请高手预测一下我这个GST融合蛋白还挂在柱子上没？？
不胜感激啊！！！！！


还有 还原型谷胱甘肽既然这么容易被氧化 那么它可以高温灭菌吗？

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-15 at 19:35 ]
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人生最黑暗的时光终于过去了
1楼 2011-10-14 22:08:36
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btx362237729

金虫 (正式写手)
还有 还原型谷胱甘肽既然这么容易被氧化 那么它可以高温灭菌吗？
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人生最黑暗的时光终于过去了
2楼2011-10-14 22:14:27
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btx362237729

金虫 (正式写手)
wanhscn: 可以加大悬赏力度！ 2011-10-15 15:35:17
小木虫的人呢 没人看看啊
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人生最黑暗的时光终于过去了
3楼2011-10-15 11:45:16
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
帮顶下，不急哈~
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4楼2011-10-15 20:15:23
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临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-15 23:47:47
应该还有的，我们的就是放在4度地，用了好多次，都可以的
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5楼2011-10-15 21:54:09
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btx362237729

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 临风7071 at 2011-10-15 21:54:09:
应该还有的，我们的就是放在4度地，用了好多次，都可以的

关键是我没放4度  我放RT了。。。。。。。。。

今晚跑胶的还没脱色，不过我没看到条带。。。。。。。杯具了
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人生最黑暗的时光终于过去了
6楼2011-10-15 22:59:41
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倒骑毛驴

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

btx362237729(金币+5): 2011-11-03 22:17:02
谷胱甘肽在高温，特别是水溶液中容易氧化，建议调低水溶液pH值。避免阳光直射
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寻找idea的孩子
7楼2011-11-03 14:58:40
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