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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 葡聚糖凝胶装柱问题
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wenjuan8809

金虫 (小有名气)

[求助] 葡聚糖凝胶装柱问题

用葡聚糖凝胶G-150分离糖蛋白，自装的层析柱，洗脱液通过泵吸入层析柱，出口让其自然流出，为什么出口的流速很慢？只有0.5ml/min，加快泵的速度，出口的流速也基本不变。请问如何才能提高出口的流速？希望做过类似实验的朋友帮忙解答一下，谢谢！
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1楼 2011-10-14 18:59:06
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huye4728

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 多谢提供！ 2011-10-17 00:37:41
wenjuan8809(金币+10): 5 2011-10-17 14:37:18
甲醇水就是慢，能用氯仿-甲醇的话试试，挺快的，比例不要超过3:1
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2楼2011-10-16 13:06:24
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wenjuan8809

金虫 (小有名气)
谢谢啊！我试试！可文献都没有用氯仿做洗脱剂的，都拿一些缓冲液。请问你是自己装的柱子吗？装柱过程有什么窍门吗？是不是和我做的不一样啊？我做的就一个柱子和泵，还有自动收集器。
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3楼2011-10-17 14:44:51
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tz1301060311

金虫 (小有名气)
G150已经很软了，你的高径比多少啊。柱压多大？
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4楼2011-10-17 15:01:52
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tz1301060311

金虫 (小有名气)
文献当中洗脱液大体就是磷酸盐缓冲液还有tris-Hcl缓冲液，缓冲液的作用也仅仅是降低凝胶对糖蛋白的吸附，尽量降低样品在柱内的扩散。有没有加压球，你可以用加压球试试，我自己用的是一套低压层析系统。
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5楼2011-10-17 15:08:08
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wenjuan8809

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tz1301060311 at 2011-10-17 15:01:52:
G150已经很软了，你的高径比多少啊。柱压多大？

高径比是15:1.请问柱压是咋么控制啊？我只是拿流动泵将缓冲液压到柱子里
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6楼2011-10-17 15:38:37
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wenjuan8809

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by tz1301060311 at 2011-10-17 15:08:08:
文献当中洗脱液大体就是磷酸盐缓冲液还有tris-Hcl缓冲液，缓冲液的作用也仅仅是降低凝胶对糖蛋白的吸附，尽量降低样品在柱内的扩散。有没有加压球，你可以用加压球试试，我自己用的是一套低压层析系统。

谢谢啊！我没有用加压球！由于刚接触这个课题，还不是太了解！请问你用的低压层析系统的大概装置组装图是什么样的？
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7楼2011-10-17 15:43:59
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