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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 带有绿木霉的菌悬液如何进行酵母细胞计数
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wy445050660

铜虫 (小有名气)

[求助] 带有绿木霉的菌悬液如何进行酵母细胞计数

我做的用酒糟发酵单细胞蛋白也就是得到酵母，先用绿木霉处理酒糟，在发酵得到酵母，可是我如何在大量的实验中监测酵母的数量，如果每瓶发酵都用血球计数的话很累眼睛，很耗时，如果用分光光度计做酵母菌计数的标准曲线，可是又不能忽略发酵过程中的绿木霉对分光值得影响，因为不能保证每瓶发酵的绿木霉都一样。酵母在560nm下测量，霉菌也在这个波长附近，因此不能忽略绿木霉的影响，广大虫有有没有什么好的办法能帮我解决如何对酵母的数量进行计数。这个关系到我实验的成败，也是我这个实验唯一的一个技术性问题了。细胞干重法我这做不了。
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1楼 2011-10-13 22:30:56
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个确实做不了，细胞分拣？流式细胞术？就是你在酵母或者木霉里面导入个荧光蛋白标记基因，让其表达，然后在进行细胞分拣计数……
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显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-10-13 23:21:52
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): lz可以试试这个方法啊 2011-10-14 08:44:07
wy445050660(金币+1): 我做的实验水平比较多，平板涂布太慢了，要作好多，有没有其他办法 2011-10-14 12:49:54
平板稀释涂布法，板上加一定浓度的triton，可以抑制绿色木霉的菌丝延伸...
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3楼2011-10-14 03:28:49
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虫儿7893

银虫 (小有名气)
关注一下，目前知道最快的方法就是血球计数啦~
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4楼2011-10-14 10:08:48
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wy445050660

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-13 23:21:52:
这个确实做不了，细胞分拣？流式细胞术？就是你在酵母或者木霉里面导入个荧光蛋白标记基因，让其表达，然后在进行细胞分拣计数……

我只是做一个发酵实验  ，做个酵母的计数，2楼得想法是不错，可是对于我有点复杂啊。
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5楼2011-10-14 12:59:38
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asznpb

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wy445050660 at 2011-10-14 12:59:38:
我只是做一个发酵实验  ，做个酵母的计数，2楼得想法是不错，可是对于我有点复杂啊。

雪球计数板吧，要么你就OD粗略计算下……
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6楼2011-10-14 13:25:43
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wy445050660

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-14 13:25:43:
雪球计数板吧，要么你就OD粗略计算下……

我也想用OD值做标准曲线 可是不用考虑里面绿木霉的影响么
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7楼2011-10-14 13:52:48
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asznpb

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wy445050660 at 2011-10-14 13:52:48:
我也想用OD值做标准曲线 可是不用考虑里面绿木霉的影响么

大概估计下吧，看你的实验要求也不是很严格，这个问题应该考虑在误差以内
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8楼2011-10-14 14:12:00
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wy445050660

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-14 14:12:00:
大概估计下吧，看你的实验要求也不是很严格，这个问题应该考虑在误差以内

那好吧我想也是，谢谢了 ，帮我解决了疑惑 ，就当是误差允许范围内的吧
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9楼2011-10-14 14:55:00
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