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lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

[求助] 关于甲基化

我目前在做甲基化检测,亚硫酸氢钠处理一步用的QIAGEN的EpiTect® Bisulfite 试剂盒,最后一步从spin column上洗脱时加进20 uL洗脱液,离心后比这要少。处理前加入的gemonic DNA的量是已知的。我想问,最终的浓度该怎么算?要去紫外定量吗?
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yunnanruby

新虫 (初入文坛)

请问你用QIAGEN 甲基化修饰时,所有程序都是按照说明来做的吗?
我在修饰后做PCR,结果阴性对照(水)都有条带,试剂也重新换了,还是有。请问是引物的问题吗?
8楼2012-05-29 19:51:58
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

西瓜: 要求不严格的话这方法最好啦 2011-10-14 18:10:14
跑个胶用marker作个定量不就行了,很方便的。
2楼2011-10-13 21:24:16
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yubwer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学,我也快做甲基化检测了,请问你实验中一共买了哪些试剂盒呢?我参考一下
3楼2011-10-14 11:00:45
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lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-13 21:24:16:
跑个胶用marker作个定量不就行了,很方便的。

听过电泳定量,没做过,我们这边都是用紫外。  我不是嫌麻烦,是想知道应不应该定量,因为加入量是已知的。
4楼2011-10-14 16:12:26
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