应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于甲基化
101/1返回列表
查看: 1347  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

[求助] 关于甲基化

我目前在做甲基化检测，亚硫酸氢钠处理一步用的QIAGEN的EpiTect® Bisulfite 试剂盒，最后一步从spin column上洗脱时加进20 uL洗脱液，离心后比这要少。处理前加入的gemonic DNA的量是已知的。我想问，最终的浓度该怎么算？要去紫外定量吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2011-10-13 16:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

西瓜: 要求不严格的话这方法最好啦 2011-10-14 18:10:14
跑个胶用marker作个定量不就行了，很方便的。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-10-13 21:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubwer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学，我也快做甲基化检测了，请问你实验中一共买了哪些试剂盒呢？我参考一下
赞一下 回复此楼
3楼2011-10-14 11:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-13 21:24:16:
跑个胶用marker作个定量不就行了，很方便的。

听过电泳定量，没做过，我们这边都是用紫外。  我不是嫌麻烦，是想知道应不应该定量，因为加入量是已知的。
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-14 16:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)
★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-10-14 18:10:34
引用回帖:
3楼: Originally posted by yubwer at 2011-10-14 11:00:45:
同学，我也快做甲基化检测了，请问你实验中一共买了哪些试剂盒呢？我参考一下

一个提genomic DNA的，很多公司都在卖，不买试剂盒自己提也行。还有就是这个QIAGEN的EpiTect® Bisulfite 试剂盒，因为是新手，我怕做不好就选择了用试剂盒，这个也可以不用的。 甲基转移酶用的NEB的，货号M0226.
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-14 16:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weipufenxi

禁言 (小有名气)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-14 17:54:05
lbpa.a.a(金币+30): 这意思是需要定量喽，我加你为好友行不？我希望和你交流。 2011-10-14 19:17:20
本帖内容被屏蔽
6楼2011-10-14 17:02:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubwer

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lbpa.a.a at 2011-10-14 16:16:45:
一个提genomic DNA的，很多公司都在卖，不买试剂盒自己提也行。还有就是这个QIAGEN的EpiTect® Bisulfite 试剂盒，因为是新手，我怕做不好就选择了用试剂盒，这个也可以不用的。 甲基转移酶用的NEB的，货号M ...

谢谢你！我也新手，做个参考
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-15 11:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yunnanruby

新虫 (初入文坛)
请问你用QIAGEN 甲基化修饰时，所有程序都是按照说明来做的吗？
我在修饰后做PCR，结果阴性对照（水）都有条带，试剂也重新换了，还是有。请问是引物的问题吗？
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-29 19:51:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4585939楼: Originally posted by yunnanruby at 2012-05-29 19:51:58
请问你用QIAGEN 甲基化修饰时，所有程序都是按照说明来做的吗？
我在修饰后做PCR，结果阴性对照（水）都有条带，试剂也重新换了，还是有。请问是引物的问题吗？

PCR有条带是在产物位置吗？   
是的话可能是PCR污染了.
赞一下 回复此楼
9楼2012-05-31 14:58:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡乱走走2011

银虫 (著名写手)
LZ你好。我也在用这个盒子做甲基化，想请教下终浓度这个问题解决了吗？我是用核酸测定仪测定了洗脱后的浓度，处理前加了2ug的DNA，处理后，发现》2ug,不知道该怎么解释？如果LZ能帮忙分析下，非常感谢！
赞一下 回复此楼
Things change, people grow.
10楼2014-04-24 21:27:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lbpa.a.a 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 基金中了 +13 laoda193707 2026-08-06 13/650 2026-08-07 20:33 by tchen18
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +3 布布和一二 2026-08-07 3/150 2026-08-07 15:09 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +4 yang182083 2026-08-06 6/300 2026-08-07 12:43 by 虫友是什么虫
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭