24小时热门版块排行榜    

查看: 1358  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

[求助] 关于甲基化

我目前在做甲基化检测,亚硫酸氢钠处理一步用的QIAGEN的EpiTect® Bisulfite 试剂盒,最后一步从spin column上洗脱时加进20 uL洗脱液,离心后比这要少。处理前加入的gemonic DNA的量是已知的。我想问,最终的浓度该怎么算?要去紫外定量吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4585939楼: Originally posted by yunnanruby at 2012-05-29 19:51:58
请问你用QIAGEN 甲基化修饰时,所有程序都是按照说明来做的吗?
我在修饰后做PCR,结果阴性对照(水)都有条带,试剂也重新换了,还是有。请问是引物的问题吗?

PCR有条带是在产物位置吗?   
是的话可能是PCR污染了.
9楼2012-05-31 14:58:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

西瓜: 要求不严格的话这方法最好啦 2011-10-14 18:10:14
跑个胶用marker作个定量不就行了,很方便的。
2楼2011-10-13 21:24:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubwer

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

同学,我也快做甲基化检测了,请问你实验中一共买了哪些试剂盒呢?我参考一下
3楼2011-10-14 11:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lbpa.a.a

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-10-13 21:24:16:
跑个胶用marker作个定量不就行了,很方便的。

听过电泳定量,没做过,我们这边都是用紫外。  我不是嫌麻烦,是想知道应不应该定量,因为加入量是已知的。
4楼2011-10-14 16:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +4 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-09 22:24 by otj2008
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见