应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 切胶回收
52/1返回列表
查看: 1891  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)

[求助] 切胶回收 已有5人参与

请问各位前辈，切胶纯化的时候，用promega柱子回收需要哪些注意事项呢？
我们回收PCR产物，都是按照说明书操作的，可是回收率特别低，120ug的PCR产物回收后才得到2.5ug。谢谢咯！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-10-09 10:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by lvbobo823 at 2011-10-10 10:43:49:
异丙醇可以尽可能多的析出DNA，就像DNA在75%酒精里析出一样，且易挥发。加异丙醇一般是在Binding buffer融化胶后加入的。其实胶回收所有产品都差不多。一般不加也可以，如果回收量小时可以试一下。我没用过Prome ...

恩，好的，我也试一试~谢谢！
赞一下 回复此楼
19楼2011-10-10 17:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

asznpb

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+4): 鼓励交流，祝顺利！ 2011-10-10 09:20:52
1,binding 和胶完全混合后挂柱子时候多重复两次，而且转速不宜太快，5000rpm足够了，再高就不大好了
2、75%乙醇洗涤完了注意要开盖空转，蒸发乙醇
3、洗脱的时候加双蒸水或elution buffer后在37℃放几分钟之后再离心洗脱
最后一步洗脱的时候多重复两次洗脱，每次用洗脱下的双蒸水或者elution buffer再重新加到柱子里重复洗脱
赞一下(2人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-10-09 11:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+4): 鼓励交流，祝顺利！ 2011-10-10 09:22:34
根据你回收片段的大小<4kb，溶胶后适量加入些异丙醇大约与回收胶质量1:1。混匀后，上柱时让溶液冷却后与柱子结合两分钟再离心，75%乙醇洗涤完后可以打开盖在室内让酒精蒸发几分钟再加洗脱液，最好洗脱液在65℃温预一下，洗脱两次洗脱液体积不要太多。不知道能否解决你的问题。
赞一下(2人) 回复此楼
hehe
3楼2011-10-09 11:33:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
对了，忘了说了，楼上补充的很完整，如果太大或者太小的话需要再加入异丙醇，洗脱液最好65℃预热……洗脱液加到柱子里后再37℃放置几分钟
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
4楼2011-10-09 12:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 初始318分求调剂（有工作经验） +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 278求调剂 +6 烟火先于春 2026-03-17 6/300 2026-03-21 01:57 by JourneyLucky
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +11 chaojifeixia 2026-03-19 12/600 2026-03-21 01:49 by 星空星月
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +3 ￣^￣゜汗 2026-03-19 4/200 2026-03-20 21:01 by zhukairuo
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭