24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (2574)
>虫友互识 (138)
>导师招生 (70)
>文献求助 (56)
>休闲灌水 (47)
>硕博家园 (40)
>考研 (26)
>考博 (22)
>博后之家 (18)
>基金申请 (17)
>论文投稿 (17)
>论文道贺祈福 (16)
>找工作 (15)
>教师之家 (14)
>公派出国 (14)
>金属 (4)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wangdandelia

木虫 (正式写手)

BioEPI: 1
应助: 0 (幼儿园)
金币: 1680.3
散金: 112
红花: 3
帖子: 505
在线: 91.1小时
虫号: 474840
注册: 2007-12-06
专业: 环境微生物学

[求助] 切胶回收已有5人参与

请问各位前辈，切胶纯化的时候，用promega柱子回收需要哪些注意事项呢？
我们回收PCR产物，都是按照说明书操作的，可是回收率特别低，120ug的PCR产物回收后才得到2.5ug。谢谢咯！

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2011-10-09 10:13:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

BioEPI: 7
应助: 12 (小学生)
金币: 4032.8
散金: 615
红花: 12
帖子: 630
在线: 422.7小时
虫号: 820881
注册: 2009-08-03
性别: GG
专业: 合成药物化学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

对了，忘了说了，楼上补充的很完整，如果太大或者太小的话需要再加入异丙醇，洗脱液最好65℃预热……洗脱液加到柱子里后再37℃放置几分钟

赞一下(1人)

回复此楼

显微镜下的世界很精彩！

4楼2011-10-09 12:19:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 20 个回答

asznpb

木虫 (正式写手)

BioEPI: 7
应助: 12 (小学生)
金币: 4032.8
散金: 615
红花: 12
帖子: 630
在线: 422.7小时
虫号: 820881
注册: 2009-08-03
性别: GG
专业: 合成药物化学

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+4): 鼓励交流，祝顺利！ 2011-10-10 09:20:52

1,binding 和胶完全混合后挂柱子时候多重复两次，而且转速不宜太快，5000rpm足够了，再高就不大好了
2、75%乙醇洗涤完了注意要开盖空转，蒸发乙醇
3、洗脱的时候加双蒸水或elution buffer后在37℃放几分钟之后再离心洗脱
最后一步洗脱的时候多重复两次洗脱，每次用洗脱下的双蒸水或者elution buffer再重新加到柱子里重复洗脱

赞一下(2人)

回复此楼

显微镜下的世界很精彩！

2楼2011-10-09 11:23:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖