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joseph09

金虫 (小有名气)

[求助] 酶标仪的使用

最近用Molecular Devices公司的酶标仪SpectraMax M2测荧光,想问有没有童鞋用过这款酶标仪的,一般测出的荧光值多少正常呀,我只有几十到几百之间,不知道在不在线性范围之内,用thermo的一台酶标仪测出来只有个位数的。另外,测荧光的话,是不是得用黑壁白底那种96孔板防止干扰呢?
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adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助发帖! 2011-10-09 20:14:23
joseph09: 金币+1, 有帮助 2012-03-25 19:41:53
酶标仪使用得不多,帮你顶贴了。
但是个人认为测荧光跟是否黑底无关,波长不一样,因此是否有可见光应该不会影响荧光。
大家一起讨论,提高~~
3楼2011-10-09 16:20:38
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, BioEPI+1): 鼓励应助发帖! 2011-10-09 20:14:35
引用回帖:
5楼: Originally posted by joseph09 at 2011-10-09 18:24:46:
底座不透明可以测荧光么?我的发射波长是655nm呀,属于可见光区

关键是你检测是是透过光还是激发光,或者是你的检测信号接收的光源来自酶标板上面还是下面?……一般来说应该是酶标板上面的发射波,然后射入检测样品,检测样品再被激发发光,再射向酶标板上面的信号接收器吧,如果你用的信号接收器在酶标板下面的话,那你的酶标板就要跟比色杯一样了,底就要很薄很透明很干净,没有划痕,不过一般很少这样的吧,按说这样的很稀有吧……所以说应该是用不透明的底了

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显微镜下的世界很精彩!
6楼2011-10-09 18:33:02
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)

我们实验室用的也是M2这一款。做荧光肯定得用黑色不透光的的板子啊,否则一束光使一个孔产生发射光,如果板子透明这束发射光又可以作为隔壁的孔的激发光,拿数据就相当混乱了啊。。。读数一般都是顶读,细胞是底读
10楼2012-05-10 21:00:52
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助发帖! 2011-10-09 20:14:15
joseph09: 金币+2, 有帮助 2012-03-25 19:41:32
我用过PE的ENSPIRE 2300 全波长酶标仪,荧光值在几万到几十万之间吧……如果你是测荧光激发光强度的话是需要用不透明的96孔酶标板就成,我用的就是全黑的……而且是平底的酶标板,有些酶标仪不能用尖底的96孔板的

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显微镜下的世界很精彩!
2楼2011-10-09 11:31:18
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
joseph09(金币+5): 谢谢! 2011-10-09 18:23:37
adslye(金币+2): 鼓励交流~~ 2011-10-10 09:03:50
joseph09: 金币+1, 有帮助 2012-03-25 19:41:59
引用回帖:
3楼: Originally posted by adslye at 2011-10-09 16:20:38:
酶标仪使用得不多,帮你顶贴了。
但是个人认为测荧光跟是否黑底无关,波长不一样,因此是否有可见光应该不会影响荧光。
大家一起讨论,提高~~

有关系的,最好是用平底的酶标板,每个孔壁不透光,因为有的酶标仪是一个个扫的,透过孔壁扫到别的孔这样接收的激发荧光就会有影响;而底座如果透明的话则会使入射光穿透,或许会对结果有影响,而不透明的孔底和孔壁则减少很多此类影响
透明的酶标板是用来测吸光度的,不透明的酶标板用来测这种激发光的强度额……

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显微镜下的世界很精彩!
4楼2011-10-09 16:34:49
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joseph09

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-09 16:34:49:
有关系的,最好是用平底的酶标板,每个孔壁不透光,因为有的酶标仪是一个个扫的,透过孔壁扫到别的孔这样接收的激发荧光就会有影响;而底座如果透明的话则会使入射光穿透,或许会对结果有影响,而不透明的孔底和 ...

底座不透明可以测荧光么?我的发射波长是655nm呀,属于可见光区
5楼2011-10-09 18:24:46
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adslye

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-09 16:34:49:
有关系的,最好是用平底的酶标板,每个孔壁不透光,因为有的酶标仪是一个个扫的,透过孔壁扫到别的孔这样接收的激发荧光就会有影响;而底座如果透明的话则会使入射光穿透,或许会对结果有影响,而不透明的孔底和 ...

哦,原来如此,学习了!谢谢~~~
7楼2011-10-10 09:07:55
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frankgaojun

银虫 (初入文坛)

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感谢参与,应助指数 +1
joseph09: 金币+1 2012-03-23 12:48:50
暂时还不知道具体是怎么工作的,我买的那个酶标板是底部透明的,是用来测吸光度的不知道行不行呢
8楼2012-03-19 19:08:20
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sunsj

铁虫 (初入文坛)

看一起是底读还是顶读,底读用的酶标板底部要求是石英玻璃底(这个比较贵),顶读选择很色不透明的板效果比较好
9楼2012-04-20 20:29:08
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