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ygllong

木虫 (正式写手)

[求助] 请帮忙分析HPLC如何分离此两个物质

两个未知化合物,走液相半制备的,分析柱呈现未基线分离两个峰,做了35%乙腈等度,32-35%乙腈水梯度,甲醇梯度,色谱图都如此,分析都未达到较好分离,所以不敢再做制备分离,请大家帮忙应当进一步怎么做呢?因为要做制备分离,最好不要引入其他物质,谢谢
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心在路上
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ygllong

木虫 (正式写手)

但是我的条件是为制备做准备的,进样量会增大,另外,我做了乙腈10%-35%,50min的梯度,这两个还是在34%左右时出峰,没有分开,所以还是请大家帮忙了,谢谢
心在路上
4楼2011-10-06 10:44:28
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News

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

ygllong(金币+3): 非常感谢,但是我还要以此分析条件放大做制备,进样量会增大 2011-10-06 10:41:26
根据分离度的计算公式,想要增大分离度1、降低进样量,使峰变得窄些。进样量大,峰宽还容易拖尾。2、降低洗脱强度、你的流动相洗脱能力太强,两个峰一下都被洗出来了。
再者,我觉得你两个峰分的差不多了,分离效果还不好,可以换等强度的不同溶剂组成试试,例如把乙腈-水换为四氢呋喃-水。
水滴石穿!!
2楼2011-10-05 21:36:00
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wzhai_yan

金虫 (正式写手)

我是来学习的
既然都来了,那就这样吧!
3楼2011-10-05 22:28:49
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专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

ygllong(金币+2): 谢谢 2011-10-08 18:00:12
制备一般不都用正向色谱吗?大多数情况分析用反向色谱,两个不一样啊。
做制备色谱当然进样量要大,峰分不开很正常,一般制备色谱只要能使目标产物的含量达到百分之八九十就不错了,然后再纯化。
水滴石穿!!
5楼2011-10-06 12:29:06
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