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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 放线菌代谢粗提物提取
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

[求助] 放线菌代谢粗提物提取

请问哪位虫友有做放线菌的代谢产物提取，能否分享提取步骤？需要准备哪些呢？比如说大孔吸附树脂柱什么的。谢谢！
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1楼 2011-09-29 10:35:33
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zhang8826857(金币+1): 鼓励一下，不过回帖应助要尽量回答的详细哦，越详细越能帮助到lz^_^ 2011-10-26 08:54:27
有机溶剂萃取，如丁酮或乙酸乙酯等。萃取液使用旋转蒸发仪浓缩蒸干即得代谢粗提物。
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2楼2011-10-26 00:19:36
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 克隆大虾 at 2011-10-26 00:19:36:
有机溶剂萃取，如丁酮或乙酸乙酯等。萃取液使用旋转蒸发仪浓缩蒸干即得代谢粗提物。

谢谢你！请问我需要做胞内胞外的话有什么区别呢？
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3楼2011-10-28 15:23:30
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ahxalg3211

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

H-xiangzhu(金币+2): 2011-11-01 12:40:22
不知道你的目的是什么呢
目的产物什么性质，还是要对代谢产物进行分析？
先行过滤/离心，固液分离，
胞外，对滤液进行分析/烘干；
胞内，则进行破碎或如1楼所说萃取
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4楼2011-10-28 16:15:34
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ahxalg3211 at 2011-10-28 16:15:34:
不知道你的目的是什么呢
目的产物什么性质，还是要对代谢产物进行分析？
先行过滤/离心，固液分离，
胞外，对滤液进行分析/烘干；
胞内，则进行破碎或如1楼所说萃取

你好！我主要是要用代谢产物来测定杀虫效果，我需要知道是胞外还是胞内，大分子还是小分子起作用。
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5楼2011-11-01 14:18:20
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baby88

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫，加油 2011-11-08 12:35:52
离心，分离菌丝体和发酵液， 菌丝体用超声破碎或80%丙酮浸泡破碎，蒸干；发酵液蒸干，分别做杀虫活性测试。
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6楼2011-11-07 18:30:51
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by baby88 at 2011-11-07 18:30:51:
离心，分离菌丝体和发酵液， 菌丝体用超声破碎或80%丙酮浸泡破碎，蒸干；发酵液蒸干，分别做杀虫活性测试。

谢谢你！发酵的上清液中也含有胞外蛋白吧？我要去除的话用酸碱沉淀法是否可以？另外菌丝体破碎后的沉淀和上清液中都含有什么大类的组分呢？比如说都含有蛋白质。
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7楼2011-11-07 18:39:11
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baby88

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by H-xiangzhu at 2011-11-07 18:39:11:
谢谢你！发酵的上清液中也含有胞外蛋白吧？我要去除的话用酸碱沉淀法是否可以？另外菌丝体破碎后的沉淀和上清液中都含有什么大类的组分呢？比如说都含有蛋白质。

除去蛋白的问题我不了解，只是确认说杀虫的活性物质是在胞内还是胞外。
不知你是只要提取杀虫物质还是说除了蛋白其他的都要，整个大类的分析？
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8楼2011-11-08 09:39:02
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by baby88 at 2011-11-08 09:39:02:
除去蛋白的问题我不了解，只是确认说杀虫的活性物质是在胞内还是胞外。
不知你是只要提取杀虫物质还是说除了蛋白其他的都要，整个大类的分析？

你好！我是要提取杀虫的活性物质，我要明白它是胞内还是胞外物质，是大分子还是小分子物质起作用。胞内物质破碎离心后我取得是上清液。
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9楼2011-11-08 15:02:57
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baby88

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-11-08 23:34:58
提取杀虫物质啊，在对菌丝体和发酵液处理后测杀虫活性，应该可以确定活性物质处于哪个部位。然后可以用不同的有机溶剂萃取，确定活性物质是易溶于哪种有机溶剂还是水中，然后对其进行分离纯化，过程中一直以杀虫活性做监控，当拿到活性物质之后就能确定了。
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10楼2011-11-08 21:50:55
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