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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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匿名

用户注销 (初入文坛)

友谊无限(金币+2): 2011-09-25 22:41:30
本帖仅楼主可见
11楼2011-09-25 22:19:30
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友谊无限

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by missiny at 2011-09-25 22:19:30:
修改
你的回收率方法有错误。回收率是指处理后的比未处理的峰面积之比。不是你说的两种方法的药物与内标比。
外标法:
做标曲,配制三个高中低浓度质控(QC),先用你的处理方法处理的到一个样品的峰面积A1,
...

您好!你说的提取回收率方法好像和我的方法一差不多,请把A2的计算步骤再阐述得具体些,谢谢!
努力追求更好!
12楼2011-09-25 22:44:59
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匿名

用户注销 (初入文坛)

友谊无限(金币+1): 2011-09-27 11:28:56
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13楼2011-09-26 21:22:27
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匿名

用户注销 (初入文坛)

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14楼2011-09-26 21:31:47
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友谊无限

金虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by missiny at 2011-09-26 21:22:27:
A2计算
取跟质控相同浓度的标准品,不用加血浆。然后吹干,再用复溶,进样,得到的的峰面积为A2.相应的高中低浓度的A1/A2就是回收率。
而你的方法一里是样品峰面积比内标,没有这样比的

多谢指教!
努力追求更好!
15楼2011-09-27 11:29:14
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友谊无限

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by missiny at 2011-09-26 21:31:47:
注意的是你的质控浓度要跟你加了血浆的质控浓度的中浓度一样哦

可否这样理解:
   比如8ug/ml的标准液。 步骤一:取8ug/ml的标准液100ul,加0.5ml血浆,再加50ul的内标,经过血浆处理后,上清液挥干,残渣用150ul的流动相复溶,进样后得到药物峰面积A1 。 步骤二:同样取8ug/ml的标准液100ul,加50ul内标,直接挥干后,用150ul流动相复溶,进样后得到药物峰面积A2 。
   提取回收率R=A1/A2,是这样吗?
努力追求更好!
16楼2011-09-27 11:42:24
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sheryhx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

友谊无限(金币+1): 2011-09-27 16:11:35
提取回收率:R=A1/A3 (直接用药物峰面积之比计算)
17楼2011-09-27 15:33:02
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lwfazyy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

友谊无限(金币+2): 2011-09-30 14:24:32
方法学考核时要考核提取回收率、过程有效率和基质效应,且待测物和内标均要考核。
做法举例:
1  取标准溶液(80ng/ml)10ul,+空白血浆500ul,+内标(50ng/ml)10ul,混匀,萃取,离心,挥干,以100ul流动相复溶,取20ul进样,得待测物和内标峰面积分别为A1和B1(待测物和内标的理论浓度分别为8ng/ml和5ng/ml)
2  取500ul空白血浆,萃取,离心,挥干,流动相配制含待测物和内标的理论浓度分别为8ng/ml和5ng/ml的溶液150ul复溶之,取20ul进样,得待测物和内标的峰面积分别为A2和B2
3 流动相配制含待测物和内标的理论浓度分别为8ng/ml和5ng/ml的溶液150ul,取20ul进样,得待测物和内标峰面积分别为A3和B3
计算:
提取回收率:待测物=A1/A2  内标=B1/B2  同类基质下的比较,表征加样 回收率大小
基质效应:待测物=A2/A3  内标=B2/B3  不同基质下,同样的理论浓度比较,表征基质对测定的影响程度,离子增强或离子抑制程度
过程有效率:待测物=A1/A3 内标=B2/B3  整个方法的总体效率

3方面结合评价一个方法的可靠与否。低、中、高浓度都要以上述办法评价。

以上为我们承接I期临床药代动力学或生物等效性研究时采取的方法学验证办法。

从现在的注册审查要求来看,回收率不一定要多高,能满足测定灵敏度要求足矣;基质效应要小,我们实验室的标准为90-110%,实践证明,基质效应大时往往测样量大时carry over明显,测定结果不可靠。

啰嗦半天,希望有所帮助
没有到不了的明天!
18楼2011-09-28 20:09:09
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lwfazyy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

友谊无限(金币+1): 2011-10-31 09:52:54
补充说明一句,内标回收率稳定也很重要。
高中低浓度回收率一致性也很重要。例如,低浓度回收率110%,中浓度90%,高浓度90%,我认为方法也不太完美。

总之,都重要都重要
没有到不了的明天!
19楼2011-09-28 20:11:48
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匿名

用户注销 (初入文坛)

友谊无限(金币+1): 2011-10-17 17:32:11
本帖仅楼主可见
20楼2011-09-28 23:47:08
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