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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 如何正确计算药代中药物的提取回收率？
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友谊无限

金虫 (小有名气)

[求助] 如何正确计算药代中药物的提取回收率？

大家好！
   我正在做药代动力学中药物的提取回收率，看了很多文献，但提取回收率的做法不一，所以想请教大家给予正确的做法。
   我是这样做提取回收率的：1.取一个浓度的标准溶液（比如8ug/ml的标准液）100ul，加入空白血浆0.5ml，再加内标50ul，加少量磷酸后，涡旋混匀。然后加入3ml的乙酸乙酯进行萃取，涡旋3min，离心（4000r/min）10min，取一定量的上清液，在45°C水浴中氮气流吹干，残渣用流动相150ul复溶，高速离心后，进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A1、A2，R1=A1/A2。   2. 另取8ug/ml的标准液100ul，再加内标50ul，混匀后于45°C水浴中氮气流吹干，残渣用流动相150ul复溶，高速离心后，进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A3、A4，R2=A3/A4 。
   提取回收率的计算如下：
   方法一：R=A1/A3 （直接用药物峰面积之比计算）
   方法二：R=R1/R2  （用药物与内标的比值计算）
   请教各位做药代动力学的朋友，我所做的药物提取回收率方法是否正确？
   计算提取回收率是应该用方法一，还是方法二？
   我参考了许多文献，但做法不一，所以希望大家能给予帮助，非常感谢！
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努力追求更好！
1楼 2011-09-24 13:38:15
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友谊无限

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by missiny at 2011-09-26 21:31:47:
注意的是你的质控浓度要跟你加了血浆的质控浓度的中浓度一样哦

可否这样理解：
   比如8ug/ml的标准液。 步骤一：取8ug/ml的标准液100ul，加0.5ml血浆，再加50ul的内标，经过血浆处理后，上清液挥干，残渣用150ul的流动相复溶，进样后得到药物峰面积A1 。 步骤二：同样取8ug/ml的标准液100ul，加50ul内标，直接挥干后，用150ul流动相复溶，进样后得到药物峰面积A2 。
   提取回收率R=A1/A2,是这样吗？
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努力追求更好！
16楼2011-09-27 11:42:24
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兰黛诗

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

友谊无限(金币+3): 2011-09-24 16:41:35
那你的标曲如何做？
直接用A1/A2吧
方法一是没道理的，根本体现不出内标的作用
方法二虽然体现了内标的作用，但是太繁琐了吧，没有必要
赞一下 回复此楼
2楼2011-09-24 14:37:08
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友谊无限

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兰黛诗 at 2011-09-24 14:37:08:
那你的标曲如何做？
直接用A1/A2吧
方法一是没道理的，根本体现不出内标的作用
方法二虽然体现了内标的作用，但是太繁琐了吧，没有必要

感谢指导！  我的标曲是用A1/A2做的，如果方法一、方法二都不合理，请问如何计算才正确?  谢谢！
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努力追求更好！
3楼2011-09-24 16:44:18
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兰黛诗

金虫 (小有名气)
不用客气，我做的回收率是将加样回收率的样品直接进样，得到样品与内标的峰面积比值，带入标准曲线，计算样品含量，将计算所得含量比加样量。
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4楼2011-09-24 17:15:57
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