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wangy0908

金虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 250.3
散金: 420
红花: 5
帖子: 350
在线: 92.9小时
虫号: 1131990
注册: 2010-10-26
性别: GG
专业: 作物种质资源与遗传育种学

[求助] 酵母阳性转化子筛选

利用pYES2转化后的酵母细胞，涂板在SD-url培养基上，菌落生长出来后，请问如何筛选其阳性的转化子呢？还是做PCR吗？以及为什么生长出来的菌落很少的呢？我用的是Invitrogen的easy transfromation Kit做的competent cell以及转化。基本上就只有20多个菌落，这样能筛选到阳性的吗？？

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1楼2011-09-23 09:46:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xiemin217

木虫 (正式写手)

应助: 23 (小学生)
金币: 1841.3
红花: 3
帖子: 319
在线: 190小时
虫号: 1319439
注册: 2011-06-10
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励应助。 2011-09-23 18:30:36
wangy0908(金币+5): xiexie 2011-09-23 21:04:53
wanhscn(金币+2): 鼓励多发帖交流，必要之时将授予专家指数！ 2011-09-24 08:50:33

1.可以涂在2缺，或者更多的板试试
2.20几个实在太少了，我一般做是满板都是，可能的你的转运DNA有问题。
3.酵母感受态状态也很重要的，要新鲜的。
4.PCR是最简单的鉴定方法了

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3楼2011-09-23 17:33:41

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