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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 碘量法测定淀粉酶活性的问题
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liouwzh

木虫 (正式写手)

[求助] 碘量法测定淀粉酶活性的问题

做细菌淀粉酶活性测定时，发酵上清液与0.5%的可溶性淀粉在55摄氏度反应10min后加入硫酸终止反应。取0.5ml反应液与5ml稀碘液显色，在OD620处测光密度。但是发现有几个样品的OD值竟然比未添加酶液的空白对照的样品的OD值，想不通是什么原因。
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1楼 2011-09-22 16:40:42
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liouwzh

木虫 (正式写手)
应该跟空白对照没有多大关系，因为测定的样品比空白对照高出非常多，空白OD为1.2左右，而测定样品的OD则为2.5左右，有时甚至超出量程。多次试验都是类似结果。
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7楼2011-09-25 11:24:32
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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你应该说清楚点啊，这叫人如何帮你？？
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学习学习
2楼2011-09-22 21:17:18
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liouwzh

木虫 (正式写手)
不好意思，落了几个字。
做细菌淀粉酶活性测定时，发酵上清液与0.5%的可溶性淀粉在55摄氏度反应10min后加入硫酸终止反应。取0.5ml反应液与5ml稀碘液显色，在OD620处测光密度。但是发现有几个样品的OD值竟然比未添加酶液的空白对照的样品的OD值高，这是否是说明淀粉并没有被酶解反而淀粉含量增加了还是说有其他原因？
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3楼2011-09-23 10:17:43
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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
liouwzh(金币+2): 多谢 2011-09-23 14:17:40
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-25 20:07:53
首先要确定碘液是否摇匀，还有就是操作错误？再有就是光波长，我看到的资料怎么是在660nm下测吸光度的。。。希望对你有帮助。。谢谢！
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学习学习
4楼2011-09-23 12:11:38
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