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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 流动相的选择
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yangxun

银虫 (小有名气)

[求助] 流动相的选择

大家好，我最近遇到一个化合物。有些困惑，向各位同行请教：
（1）化合物的PKa有两个值，一个3左右，一个10左右，液相分析时流动相该如何选择呢？
（2）实验发现用乙腈与PH8.0磷酸盐缓冲盐做流动相会好一些，只有菲罗门的Gemini-C18这款柱子对称性好，其余C18柱对称性均低于0.6，但Gemini的重现性不好，原本能分开的两个峰越来越近，甚至小杂质峰都不能分开，是不是这款柱子很脆弱？还是方法不行呢？
    谢谢各位了！！！期待您的回复！
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共同学习，共同进步！
1楼2011-09-22 10:52:42
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News

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yangxun at 2011-09-24 09:19:45:
谢谢回复。柱子没平衡好，应该不是吧，因为我过段时间发现就分得不好了，但是如果柱子经过了反冲，就会变好。

一两次反冲倒没什么，但反冲次数多了柱子就报废了！！反冲后，柱头前的死体积增大，你的方法不能很好重现的。
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水滴石穿！！
6楼2011-09-24 12:18:08
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查看全部 8 个回答

ltxin2009

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-09-23 14:29:51
色谱柱多数不耐碱。
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2楼2011-09-23 14:29:02
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News

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
yangxun(金币+1): 谢谢 2011-09-24 09:18:10
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-09-24 09:56:14
1/选择靠近中性的流动相，对柱子损伤小些。
2、你的出峰不能很好的重现，不知是不是你的柱子没能平衡好（运行时间有问题）,你就进下一针了？
再者你改变一下你的缓冲盐浓度试试看。钾离子浓度对于饱和柱子活性部位还是有影响的。但钾离子浓度过高也会导致峰不能很好的重现。
乙腈不行的话还可以换四氢呋喃试试。
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水滴石穿！！
3楼2011-09-23 16:02:54
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tianzhibin

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
yangxun(金币+19): 2011-09-24 09:20:29
lk590(金币+1): 谢谢参与 2011-09-24 09:56:28
可能是缓冲液浓度有点低了。
赞一下(1人) 回复此楼
都在路上，都要努力。
4楼2011-09-23 16:18:24
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