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jove0717

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE浓度的选择

请教:使用SDS-page分析分子量在200~300KD的蛋白,需要配置什么浓度什么交联度的凝胶,谢谢
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快乐科研,学无止境
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lxy19870124

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流,祝顺利! 2011-11-04 16:17:28
7.5%的胶,你试一试,电压高一点,时间长一点,溴酚蓝到底的时候再多跑10-20分钟,我试过。
遇到问题,解决问题。
5楼2011-11-04 16:10:15
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助。 2011-09-22 19:51:25
12.5% 的不行,我试过。走不开。
6%的分辨率也不行,一般只用作上层的堆积胶。

所以建议你配置8 或 10% 的试试。
另外,加大电泳时间,例如通常是120V 60-70分钟电泳,你可以试试90-120分钟。记得使用大分子量的蛋白marker。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2011-09-22 13:47:09
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zmchail

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

被测样的分子量较大,可以试试8%或6%的胶,也可以尝试用琼脂胶跑一下
6楼2011-11-04 19:43:45
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