24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5995  |  回复: 6

jj_ocean

铜虫 (初入文坛)

[求助] QPCR 阴性对照没有加模板 为什么还有溶解曲线峰 已有1人参与

QPCR 阴性对照没有加模板cDNA,用水代替, 为什么还有溶解曲线峰?有加引物,并且阴性溶解曲线的峰和相应的加有模板的峰的温度是一致的!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tcguobing

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

看上去感觉是引物污染了?不过我也是新手~
2楼2011-10-25 14:43:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoche

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~~ 2011-10-27 09:41:42
有可能是引物二聚体。楼主看看溶解曲线和别的一样吗?
3楼2011-10-26 21:57:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.你的引物不好,会形成二聚体,同时TM一致极可能说明二聚体和你的产物一样,也就是引物特异性不高,没有特异性产物。
2.可能引物被cDNA污染,这个有个简单的排除办法,你做3个加入不同浓度cDNA。最后CT值应该会依次降低,或升高。如果出现这个趋势,说明PCR产物是从模板P出来的,引物被污染。同理,如果没出现趋势,则说明是引物二聚体。
4楼2011-10-27 09:46:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qlj0125

铜虫 (初入文坛)

我最近也是遇到了这样的问题,好郁闷啊
不为失败找理由,只为成功想办法
5楼2012-03-13 14:59:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sicauwht

金虫 (正式写手)

我做的定量PCR始终有阴性,阴性就是用水来代替模版。而且水也是我自己灭过两次,也过滤了的,而且我跑普通的PCR的验证过都没阴性。但是就是定量的时候有,我做的是功能基因。谁可以告诉我这是什么原因造成的啊,有什么解决办法么?会是PCR程序的问题么?

我也是做的RT-qPCR
被时代和社会和谐的80后!
6楼2012-07-16 20:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦幻心雨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by sicauwht at 2012-07-16 20:03:51
我做的定量PCR始终有阴性,阴性就是用水来代替模版。而且水也是我自己灭过两次,也过滤了的,而且我跑普通的PCR的验证过都没阴性。但是就是定量的时候有,我做的是功能基因。谁可以告诉我这是什么原因造成的啊,有什 ...

请问您的问题后来解决了吗,我最近也遇到这问题,谢谢!
科研工作于我若即若离。。。
7楼2017-03-05 16:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jj_ocean 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程085601,270求调剂 +22 @ASDF1234 2026-04-08 23/1150 2026-04-08 22:03 by zhouyuwinner
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +4 超人不会飞@ 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:18 by 学员tURuqU
[考研] 324求调剂 +17 想上学求调 2026-04-03 17/850 2026-04-08 20:04 by 我减肥1
[考研] 301求调剂 +10 细胞相关蛋白 2026-04-03 10/500 2026-04-08 10:36 by tjzhao
[考研] 274求调剂 +4 山阿蔓 2026-04-07 4/200 2026-04-08 09:49 by eyeliyang
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 农学,求调剂,314分 +4 访客记录可爱 2026-04-04 4/200 2026-04-07 21:07 by 等岸
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 学硕化学工程与技术,一志愿中国海洋大学320+求调剂 +9 披星河 2026-04-02 9/450 2026-04-07 12:53 by 尽舜尧1
[考研] 0703化学 +9 goldtt 2026-04-02 11/550 2026-04-06 10:35 by 无际的草原
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 工科08-机械专硕-求调剂 +3 雷欧飞踢 2026-04-02 3/150 2026-04-05 18:49 by 蓝云思雨
[考研] 358求调剂 +7 秋gk 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:29 by huangmoli
[考研] 一志愿北京化工大学,初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 考研调剂 +5 四川王涛 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:18 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿双非085502,267分,过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:46 by 欣喜777
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 338求调剂,一志愿能源动力,外语是日语203 +5 zzz,,r 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:45 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见