应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化
71/1返回列表
查看: 883  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

小丁山

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化

本人做蛋白表达纯化，没有加His-Tag，现在蛋白表达出来了，45kd，有活性，但胞外杂蛋白较多，如何纯化呢，望大家指教！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢
1楼 2011-09-21 14:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4, MolEPI+1): 鼓励！ 2011-09-21 17:27:44
（1）还是加上Histag吧，比你找纯化方法简单多了。
（2）可以去试试离子交换色谱纯化，不过在色谱纯化之前，还得进行硫酸铵沉降之类的浓缩和粗纯化步骤，优化条件很麻烦很麻烦，纯化效果还不一定好。做得好的话，工作量都够你写一篇专门的蛋白质纯化条件优化的文章了-_-
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-09-21 15:25:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丁山

铜虫 (小有名气)
那就得倒过来重新再做转化表达了啊
赞一下 回复此楼
3楼2011-09-21 15:32:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imfly77

木虫 (小有名气)
★ ★
西瓜(金币+2): 很热心哦！ 2011-09-21 17:28:02
重做转化表达，至少实验里需要重新摸索和学习的东西少，毕竟从你的工作来讲，你的目标是为了获得纯化的目的蛋白。重新做克隆，时间也就是2周左右；
如果你现在转而去研究如何在不带Histag条件下纯化目的蛋白，就偏离了你的研究方向，而且可能做了很多工作，但结果并不理想，耽误很多时间。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-21 15:36:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那就盐析 离子交换 分子筛都试试
赞一下 回复此楼
5楼2011-09-21 17:03:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

辉辉集团

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那就盐析 离子交换 分子筛都试试
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-21 17:03:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kid0i

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 说的不错 2011-09-30 07:43:17
不想反攻的话就过柱，但比较麻烦，要充分了解此蛋白质的性质！
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-09-30 00:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小丁山 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭