应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）
51/1返回列表
查看: 2738  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)

[交流] BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）

我用的是Pierce的BCA试剂盒，工作液A:B=50:1,200ul工作液加10微升不同浓度的BSA标准蛋白液（0.25,0.5,0.75,1.0,1.5,2.0mg/ml），因为建议稀释BSA时用与蛋白相同的溶液，就用了试剂盒中的的bufferA(细胞核和胞质蛋白提取试剂盒 )。得到的A562值分别为0.2934,0.6408,1.0168,1.1933,1.8290,2.2797
得到标准曲线y = 1.152x + 0.048
不过我怎么感觉不太对劲，那平常师姐测得蛋白562值0.3-0.5之间，岂不是浓度很小，也就是浓度小于0.5mg/ml
请问这样的曲线合适吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-09-19 09:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
你用该还要加一个蛋白浓度为0的标准品，再做标准曲线。而且每次标准曲线不一定是一样的，总有不同。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-20 08:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:39
你的测得A562的值应该算正常的，看你标准品配的浓度范围的，我们最高浓度为2000ug/mL的，在37摄氏度孵育半个小时测得吸光度有1.7以上。你师姐是不是没孵育那么长时间啊，这样测出来的吸光度值都会偏小的。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-09-20 08:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

girlfisher

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:51
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-09-20 11:20:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by girlfisher at 2011-09-20 11:20:58:
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了

按照说明书配的呀，虽然说吸光度最好控制在0.8以内，线性度好些
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-20 14:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 070300化学求调剂 +3 苑豆豆 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:48 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 265求调剂 +3 Jack?k?y 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:17 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林，给自己招师弟中～ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭