应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）
51/1返回列表
查看: 3213  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)

[交流] BCA求标准曲线（用过Pierce的BCA试剂盒的最好）

我用的是Pierce的BCA试剂盒，工作液A:B=50:1,200ul工作液加10微升不同浓度的BSA标准蛋白液（0.25,0.5,0.75,1.0,1.5,2.0mg/ml），因为建议稀释BSA时用与蛋白相同的溶液，就用了试剂盒中的的bufferA(细胞核和胞质蛋白提取试剂盒 )。得到的A562值分别为0.2934,0.6408,1.0168,1.1933,1.8290,2.2797
得到标准曲线y = 1.152x + 0.048
不过我怎么感觉不太对劲，那平常师姐测得蛋白562值0.3-0.5之间，岂不是浓度很小，也就是浓度小于0.5mg/ml
请问这样的曲线合适吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-19 09:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
你用该还要加一个蛋白浓度为0的标准品，再做标准曲线。而且每次标准曲线不一定是一样的，总有不同。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-20 08:43:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

elyn-yu

木虫 (初入文坛)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:39
你的测得A562的值应该算正常的，看你标准品配的浓度范围的，我们最高浓度为2000ug/mL的，在37摄氏度孵育半个小时测得吸光度有1.7以上。你师姐是不是没孵育那么长时间啊，这样测出来的吸光度值都会偏小的。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-09-20 08:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

girlfisher

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
athenawj(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): good 2011-09-20 17:20:51
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-09-20 11:20:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

athenawj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by girlfisher at 2011-09-20 11:20:58:
你的标准曲线配错了1个数量级
Pierce BCA法的线性范围在5-250ug/ml
另外，吸光值超过1就不准了

按照说明书配的呀，虽然说吸光度最好控制在0.8以内，线性度好些
赞一下 回复此楼
6楼2011-09-20 14:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-18 02:06 by cITaGg3p5edr
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 6/300 2026-09-18 01:54 by cITaGg3p5edr
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 9/450 2026-09-17 23:05 by cuPZTDXS3VOd
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +7 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 22:53 by cuPZTDXS3VOd
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-17 22:39 by cuPZTDXS3VOd
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 23jxep3nCNZb 2026-09-14 6/300 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:52 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 6/300 2026-09-17 02:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭