1楼: Originally posted by 红色日历 at 2011-09-16 11:10:09:
第一道是marker，后面的是跑的梯度，但是条带都不是很明显，一片一片的。我的目的片段是257bp，求高手给指点迷津。
我跑的三十个循环，一个师姐说增加循环数看看能不能好点，但是另一个师姐说要降低循环数，否则 ...

14楼: Originally posted by 张小逸 at 2011-09-30 09:16:34:
你的目的片段数是怎么知道的啊？是已知的还是怎么？谢谢

13楼: Originally posted by 科研人 at 2011-09-25 18:29:04:
我建议你检查下 引物的退火温度 是不是有点低，特异性怎么样，回头比对下；如果没问题的话，可以适当提高退火温度，增加循环数！！

16楼: Originally posted by tjd0928 at 2011-10-30 20:53:17:
产生了非特异性条带，下面的一个条带是目的片段，上面的是非目的片段。不知道你做这个PCR的目的是什么，如果要测序的话目的片段割胶回收就可以了。如果只是要观察条带特异性，那1、提高退火温度  2、重新设计引物。