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红色日历

木虫 (小有名气)

[求助] 这是我跑的PCR电泳图,求高手指点!

第一道是marker,后面的是跑的梯度,但是条带都不是很明显,一片一片的。我的目的片段是257bp,求高手给指点迷津。
我跑的三十个循环,一个师姐说增加循环数看看能不能好点,但是另一个师姐说要降低循环数,否则面积更大。。。。
呜呜,我刚刚开始做,什么都不懂,到底该听谁的啊?有没有哪位高手指点一下怎样分析电泳图结果,优化实验条件啊?不胜感激!!!

[ Last edited by 红色日历 on 2011-9-16 at 11:13 ]
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xiaoaqiu

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-09-25 09:20:44
PCR两条带亮度基本一样,所以建议考虑引物特异性,另外可以提高退火温度,另外建议降低电泳过程电压。
12楼2011-09-24 21:28:19
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查看全部 18 个回答

lj20099873

至尊木虫 (职业作家)

日出东海落西山
2楼2011-09-16 11:22:01
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横眉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

amisking: 乱码啊! 2011-09-16 21:37:15
1???高退???温度 2适当???高模???浓度,循环数30个??试试

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
3楼2011-09-16 12:33:20
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横眉

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1???高退???温度 2适当???高模???浓度,循环数30个??试试

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
4楼2011-09-16 12:34:00
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