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shuihaizi

金虫 (小有名气)

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[求助] pUC19-SalI单酶切，连个2500片段，连不上？

最近在做单酶切连接，怎么也连不上，请大家帮忙！
pUC19和2500bp的目的片段通过SalI单酶切，进行连接，不知道什么原因总是连不上？

本不应该难连啊？

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1楼2011-09-05 21:45:00

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瓶儿花

金虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
shuihaizi(金币+2): 2011-09-06 17:39:59
西瓜:编辑内容 2011-09-06 17:53
西瓜(金币+3): Good！有的符号刚好跟表情的代码一样，被自动替换成表情了，我已稍微改了下。 2011-09-06 17:54:24

使用的是TAKARA的Alkaline Phosphatase（CIAP）（Calf intestine），Code No.: D2250，
反应体系：
载体 20μL
10×Alkaline Phosphatase Buffer 5μL
CIAP 1μL
ddH20 23μL
37℃水浴30min后加入1μLCIAP，50℃水浴30min，最后回收纯化。可以使用TAKARA公司的DNA片段纯化试剂盒纯化，效果很好的。
祝你好运哦！

[ Last edited by 西瓜 on 2011-9-6 at 17:53 ]