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pUC19-SalI单酶切，连个2500片段，连不上？
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最近在做单酶切连接，怎么也连不上，请大家帮忙！ pUC19和2500bp的目的片段通过SalI单酶切，进行连接，不知道什么原因总是连不上？  本不应该难连啊？ |
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3楼2011-09-06 09:53:27
6楼2011-09-06 12:33:28
【答案】应助回帖
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shuihaizi(金币+2): 2011-09-06 17:39:59
西瓜:编辑内容 2011-09-06 17:53
西瓜(金币+3): Good！有的符号刚好跟表情的代码一样，被自动替换成表情了，我已稍微改了下。 2011-09-06 17:54:24
shuihaizi(金币+2): 2011-09-06 17:39:59
西瓜:编辑内容 2011-09-06 17:53
西瓜(金币+3): Good！有的符号刚好跟表情的代码一样，被自动替换成表情了，我已稍微改了下。 2011-09-06 17:54:24
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使用的是TAKARA的Alkaline Phosphatase（CIAP）（Calf intestine），Code No.: D2250， 反应体系： 载体 20μL 10×Alkaline Phosphatase Buffer 5μL CIAP 1μL ddH20 23μL 37℃水浴30min后加入1μLCIAP，50℃水浴30min，最后回收纯化。可以使用TAKARA公司的DNA片段纯化试剂盒纯化，效果很好的。 祝你好运哦！ [ Last edited by 西瓜 on 2011-9-6 at 17:53 ] |
11楼2011-09-06 16:43:23