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fydxx

金虫 (小有名气)

[求助] 分级沉淀 乙醇 多糖

我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候,乙醇添加量是怎样确定的?
  比如我配置了5%的糖溶液,添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%,怎样计算?
      量取100毫升溶液,是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升?
  离心取得沉淀后,再怎样添加乙醇,使其浓度达到25%?
      是否直接向离心之后得到的上清液中添加16毫升无水乙醇?考虑到离心过 程中会有乙醇的损失,这样量取的话是否准确?
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ab20063530

木虫之王 (文坛精英)

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
junwen6516(金币+2): 鼓励交流 2011-09-05 21:05:26
fydxx(金币+5): 2011-09-06 08:05:35
感觉被你绕糊涂了。
我说说,我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀,这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液,加入700ml无水乙醇后的浓度,大概是70%。
此外,对于多糖的分级沉淀,我们以前的做法:在多糖溶液中缓慢的加入无水乙醇,当其有絮状沉淀出现时,停止加入,冰箱静置,离心。此后,对离心的上清液,重复上述步骤,直至不会沉淀为止。
4楼2011-09-05 19:53:54
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冰雪灵魂

木虫 (著名写手)

食品科学家族族长

【答案】应助回帖

fydxx(金币+2): 2011-09-05 16:11:06
一般都是用酒精计来测量,买一个,不用这么麻烦~
要想得到常人所不能得到的,就懂得付出常人所不能付出的!
2楼2011-09-05 13:38:48
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fydxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by fydxx at 2011-09-05 10:22:31:
我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候,乙醇添加量是怎样确定的?
  比如我配置了5%的糖溶液,添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%,怎样计算?
      量取100毫升溶液,是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升? ...

酒精计不是只能测水和乙醇的混合溶液么?
我配置的糖溶液成糊状,流动性很差,直接把酒精计放进去测会不会不准啊?我感觉糊状溶液的浮力会很大的。
3楼2011-09-05 16:10:41
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fydxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ab20063530 at 2011-09-05 19:53:54:
感觉被你绕糊涂了。
我说说,我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀,这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液,加入700ml无水乙醇后的浓度,大概是70%。
此外, ...

因为乙醇分级沉淀的过程中,乙醇的终浓度是不断提高的,
我想知道在离心后的上清液中再添加无水乙醇,怎样确定乙醇的终浓度?
是按体积比计算之后,再减去第一次添加的乙醇量么?当然是前提是保证冷冻离心过程中么有液体损失,或是忽略沉淀的体积。
5楼2011-09-06 08:14:50
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