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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 分级沉淀 乙醇 多糖
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fydxx

金虫 (小有名气)

[求助] 分级沉淀 乙醇 多糖

我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候，乙醇添加量是怎样确定的？
  比如我配置了5%的糖溶液，添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%，怎样计算？
      量取100毫升溶液，是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升？
  离心取得沉淀后，再怎样添加乙醇，使其浓度达到25%？
      是否直接向离心之后得到的上清液中添加16毫升无水乙醇？考虑到离心过 程中会有乙醇的损失，这样量取的话是否准确？
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fydxx

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1楼 2011-09-05 10:22:31
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ab20063530

木虫之王 (文坛精英)

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
junwen6516(金币+2): 鼓励交流 2011-09-05 21:05:26
fydxx(金币+5): 2011-09-06 08:05:35
感觉被你绕糊涂了。
我说说，我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀，这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液，加入700ml无水乙醇后的浓度，大概是70%。
此外，对于多糖的分级沉淀，我们以前的做法:在多糖溶液中缓慢的加入无水乙醇，当其有絮状沉淀出现时，停止加入，冰箱静置，离心。此后，对离心的上清液，重复上述步骤，直至不会沉淀为止。
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4楼2011-09-05 19:53:54
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冰雪灵魂

木虫 (著名写手)

食品科学家族族长

【答案】应助回帖

fydxx(金币+2): 2011-09-05 16:11:06
一般都是用酒精计来测量，买一个，不用这么麻烦~
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要想得到常人所不能得到的，就懂得付出常人所不能付出的！
2楼2011-09-05 13:38:48
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fydxx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by fydxx at 2011-09-05 10:22:31:
我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候，乙醇添加量是怎样确定的？
  比如我配置了5%的糖溶液，添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%，怎样计算？
      量取100毫升溶液，是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升？ ...

酒精计不是只能测水和乙醇的混合溶液么？
我配置的糖溶液成糊状，流动性很差，直接把酒精计放进去测会不会不准啊？我感觉糊状溶液的浮力会很大的。
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3楼2011-09-05 16:10:41
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fydxx

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ab20063530 at 2011-09-05 19:53:54:
感觉被你绕糊涂了。
我说说，我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀，这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液，加入700ml无水乙醇后的浓度，大概是70%。
此外， ...

因为乙醇分级沉淀的过程中，乙醇的终浓度是不断提高的，
我想知道在离心后的上清液中再添加无水乙醇，怎样确定乙醇的终浓度？
是按体积比计算之后，再减去第一次添加的乙醇量么？当然是前提是保证冷冻离心过程中么有液体损失，或是忽略沉淀的体积。
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5楼2011-09-06 08:14:50
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