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fydxx

金虫 (小有名气)

[求助] 分级沉淀 乙醇 多糖

我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候,乙醇添加量是怎样确定的?
  比如我配置了5%的糖溶液,添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%,怎样计算?
      量取100毫升溶液,是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升?
  离心取得沉淀后,再怎样添加乙醇,使其浓度达到25%?
      是否直接向离心之后得到的上清液中添加16毫升无水乙醇?考虑到离心过 程中会有乙醇的损失,这样量取的话是否准确?
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ab20063530

木虫之王 (文坛精英)

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
junwen6516(金币+2): 鼓励交流 2011-09-05 21:05:26
fydxx(金币+5): 2011-09-06 08:05:35
感觉被你绕糊涂了。
我说说,我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀,这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液,加入700ml无水乙醇后的浓度,大概是70%。
此外,对于多糖的分级沉淀,我们以前的做法:在多糖溶液中缓慢的加入无水乙醇,当其有絮状沉淀出现时,停止加入,冰箱静置,离心。此后,对离心的上清液,重复上述步骤,直至不会沉淀为止。
4楼2011-09-05 19:53:54
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普通回帖

冰雪灵魂

木虫 (著名写手)

食品科学家族族长

【答案】应助回帖

fydxx(金币+2): 2011-09-05 16:11:06
一般都是用酒精计来测量,买一个,不用这么麻烦~
要想得到常人所不能得到的,就懂得付出常人所不能付出的!
2楼2011-09-05 13:38:48
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fydxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by fydxx at 2011-09-05 10:22:31:
我想请教下 在用乙醇分级沉淀多糖的时候,乙醇添加量是怎样确定的?
  比如我配置了5%的糖溶液,添加无水乙醇使乙醇的浓度变成15%,怎样计算?
      量取100毫升溶液,是否按体积比计算得乙醇添加量为17毫升? ...

酒精计不是只能测水和乙醇的混合溶液么?
我配置的糖溶液成糊状,流动性很差,直接把酒精计放进去测会不会不准啊?我感觉糊状溶液的浮力会很大的。
3楼2011-09-05 16:10:41
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fydxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ab20063530 at 2011-09-05 19:53:54:
感觉被你绕糊涂了。
我说说,我以前沉淀多糖的体会吧。
一般多糖易在酒精浓度70%左右沉淀,这里的酒精浓度指的是加入多糖溶液中的终浓度。比如你300ml多糖溶液,加入700ml无水乙醇后的浓度,大概是70%。
此外, ...

因为乙醇分级沉淀的过程中,乙醇的终浓度是不断提高的,
我想知道在离心后的上清液中再添加无水乙醇,怎样确定乙醇的终浓度?
是按体积比计算之后,再减去第一次添加的乙醇量么?当然是前提是保证冷冻离心过程中么有液体损失,或是忽略沉淀的体积。
5楼2011-09-06 08:14:50
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ab20063530

木虫之王 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

fydxx(金币+3): 2011-09-06 18:42:32
引用回帖:
5楼: Originally posted by fydxx at 2011-09-06 08:14:50:
因为乙醇分级沉淀的过程中,乙醇的终浓度是不断提高的,
我想知道在离心后的上清液中再添加无水乙醇,怎样确定乙醇的终浓度?
是按体积比计算之后,再减去第一次添加的乙醇量么?当然是前提是保证冷冻离心过程 ...

可以用酒精密度计去测定终浓度的。
我一般是沉淀后测定上清液的体积(乙醇浓度还是为前次沉淀的终浓度,但要注意防止乙醇的挥发),再次加入无水乙醇后,还是按之前的方法确定终浓度。
6楼2011-09-06 11:44:54
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fydxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ab20063530 at 2011-09-06 11:44:54:
可以用酒精密度计去测定终浓度的。
我一般是沉淀后测定上清液的体积(乙醇浓度还是为前次沉淀的终浓度,但要注意防止乙醇的挥发),再次加入无水乙醇后,还是按之前的方法确定终浓度。

是不是可以用酒精计测定离心后上清液的乙醇浓度?
也可以用计算的方式来确定乙醇的添加量?前提就是保证过程中乙醇没有挥发?
7楼2011-09-06 18:42:11
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ab20063530

木虫之王 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

树树8013(食品EPI+1): 谢谢跟踪解答交流。符合EPI发放标准。 2011-09-07 08:36:06
sweety: 回帖置顶 2011-12-30 09:23:28
引用回帖:
7楼: Originally posted by fydxx at 2011-09-06 18:42:11:
是不是可以用酒精计测定离心后上清液的乙醇浓度?
也可以用计算的方式来确定乙醇的添加量?前提就是保证过程中乙醇没有挥发?

对,可以用酒精计,不过酒精计同温度有关,有时要换算一下。
我一般是用计算的方法来确定的(主要是我做的要求不是很精确,而且在不大的误差内,且实验结果都还理想),不过这同你实验设计的要求有关。
8楼2011-09-06 18:52:28
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249367652

木虫 (小有名气)

不能用酒精计,酒精计是体积比出来的参数,一两句说不清,我建议你去看看制药上怎么醇沉的。
奋斗成就未来!
9楼2011-09-20 10:26:20
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fydxx

金虫 (小有名气)

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лл
10楼2011-09-20 21:32:08
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