应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 聚丙烯酰胺凝胶电泳
51/1返回列表
查看: 2781  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

linda1838

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳

现在在做聚丙烯酰胺电泳，胶浓度为15%，电压100v，电流30mA左右。运行后15min，loadingbuffer都不动，这是怎么回事？现在实验都不能进行了。
我确定我的loadingbuffer质量是没问题的。我觉得我可能是细节上出了问题，求高手指点！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

DNA纳米技术

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-05 09:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这事儿我干过，后来重新配了凝胶再跑就没问题了，当时也没找出什么原因，期待高手回答呵呵
重新做块胶试试吧
赞一下 回复此楼
一切开始于结束之后
5楼2011-09-05 12:51:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5): good 2011-09-12 08:35:41
引用回帖:
1楼: Originally posted by linda1838 at 2011-09-05 09:19:55:
现在在做聚丙烯酰胺电泳，胶浓度为15%，电压100v，电流30mA左右。运行后15min，loadingbuffer都不动，这是怎么回事？现在实验都不能进行了。
我确定我的loadingbuffer质量是没问题的。我觉得我可能是细节上出了问 ...

是不是胶浓度有问题。浓缩胶浓度一般为3%-5%，分离胶浓度根据待分离样品的情况选择适当的分离胶浓度，通常使用的15％的聚丙烯酰胺凝胶的分离范围是104～105，即分子量小于104的蛋白质可以不受孔径的阻碍而通过凝胶，而分子量大于105的蛋白质则难以通过凝胶孔径，这两种情况的蛋白质都不能得到分离。所以如果要分离较大的蛋白质，需要使用低浓度如10％或7.5%的凝胶（孔径较大）；而对于分离较小的蛋白质，使用的较高浓度凝胶（孔径较小）可以得到更好的分离效果。
赞一下(1人) 回复此楼
无完人！
2楼2011-09-05 09:51:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by linda1838 at 2011-09-05 09:19:55:
现在在做聚丙烯酰胺电泳，胶浓度为15%，电压100v，电流30mA左右。运行后15min，loadingbuffer都不动，这是怎么回事？现在实验都不能进行了。
我确定我的loadingbuffer质量是没问题的。我觉得我可能是细节上出了问 ...

是不是胶浓度有问题。浓缩胶浓度一般为3%-5%，分离胶浓度根据待分离样品的情况选择适当的分离胶浓度，通常使用的15％的聚丙烯酰胺凝胶的分离范围是104～105，即分子量小于104的蛋白质可以不受孔径的阻碍而通过凝胶，而分子量大于105的蛋白质则难以通过凝胶孔径，这两种情况的蛋白质都不能得到分离。所以如果要分离较大的蛋白质，需要使用低浓度如10％或7.5%的凝胶（孔径较大）；而对于分离较小的蛋白质，使用的较高浓度凝胶（孔径较小）可以得到更好的分离效果。
赞一下 回复此楼
无完人！
3楼2011-09-05 09:52:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linda1838

新虫 (初入文坛)
不好意思我没有说完全，我用的是非变性，连续的凝胶系统。分离的物质是十几个碱基的寡核苷酸。我觉得即使是凝胶浓度大了点，跑15分钟，不能连buffer都不带动的啊。
赞一下 回复此楼
4楼2011-09-05 09:58:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 12/600 2026-11-09 01:46 by l48hFd8Nwae2
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-09 01:42 by l48hFd8Nwae2
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-09 01:35 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 11/550 2026-11-09 01:35 by l48hFd8Nwae2
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 01:31 by l48hFd8Nwae2
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 01:24 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-06 01:51 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭