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临风7071

木虫 (正式写手)

[求助] 非变性电泳

各位好,本人最近做蛋白,我的蛋白是形成同源而具体的,我想看一下,我的蛋白突变后还能否形成二聚体,但是不幸的是我跑的活性电泳蛋白根本跑不动,基本上都留在上样孔附近,因为我看到溴酚蓝已经跑到底了,所以才停止电泳的,可是染色才发现我的蛋白还在上样孔附近,不知道什么原因?我按照别人相同的方法做的,80v,2h,人家跑的挺好的,我的却跑不下去,给为帮帮小弟吧?感激不尽啊。。。。。。
附件是我的电泳图,最左边两个是蛋白WT和mutant,而且都是煮过的,隔一个空孔,右边的全是未经煮过的活性的蛋白,只是上样量不同,都是WT和mutant两两一组,且WT先,mutant后,但是看我的mutant带的位置和wt的不同,应该是氨基酸的突变影响了空间结构,二且突变的活性的蛋白的位置貌似比煮过的活性的蛋白的位置高一点,这个能说明我的蛋白突变后是单体吗,不能形成二具体?,
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