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yangliguo007木虫 (著名写手)
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[求助]
单糖的PMP衍生化遇到问题，困扰许久，请各位大侠帮忙。谢谢！！十分感谢！
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我现在做标准单糖的PMP衍生化，用HPLC检测，用的是C18柱，对照品是葡萄糖、甘露糖、半乳糖，鼠李糖，阿拉伯糖和木糖，出现的问题是：各单糖对照品在同一个时间出峰，混和各单糖标品后也只出现一个峰，到底是怎么回事呢？？？流动相比例我也尝试很多种，可还是出现同样的问题，实验进行不下去，头疼啊！！！！具体的实验方法 单糖混合液的制备： 配制浓度为0.36μg单糖标准品溶液，取其100μL与0.6mol/LNaOH溶液100μL混合，再加入0.5mol/LPMP甲醇溶液200μL混匀。70℃水浴反应100min,冷却至室温10min后，加0.3mol/LHCl溶液200μL中和，加水900μL，混匀，加入氯仿1.5m萃取，混匀，静置，弃氯仿相，依法萃取3次，水相经0.45μm滤膜过滤后进样。 色谱条件： 进样量20μL，流动相为17%的乙腈-磷酸盐缓冲液，流速1mL/min |
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3楼2011-08-31 09:21:46