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yangliguo007木虫 (著名写手)
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[求助]
单糖的PMP衍生化遇到问题,困扰许久,请各位大侠帮忙。谢谢!!十分感谢!
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我现在做标准单糖的PMP衍生化,用HPLC检测,用的是C18柱,对照品是葡萄糖、甘露糖、半乳糖,鼠李糖,阿拉伯糖和木糖,出现的问题是:各单糖对照品在同一个时间出峰,混和各单糖标品后也只出现一个峰,到底是怎么回事呢???流动相比例我也尝试很多种,可还是出现同样的问题,实验进行不下去,头疼啊!!!!具体的实验方法 单糖混合液的制备: 配制浓度为0.36μg单糖标准品溶液,取其100μL与0.6mol/LNaOH溶液100μL混合,再加入0.5mol/LPMP甲醇溶液200μL混匀。70℃水浴反应100min,冷却至室温10min后,加0.3mol/LHCl溶液200μL中和,加水900μL,混匀,加入氯仿1.5m萃取,混匀,静置,弃氯仿相,依法萃取3次,水相经0.45μm滤膜过滤后进样。 色谱条件: 进样量20μL,流动相为17%的乙腈-磷酸盐缓冲液,流速1mL/min |
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dazhu821
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xingkong544
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您好,我最近也在做这个实验,也是遇到了同样的问题,我想问下您当时是怎样解决的啊?我已经被困了快3个月了…泪奔啊。虽然不知道您能不能回答我,还是抱着侥幸的心态试试吧![]() 发自小木虫Android客户端 |
4楼2017-05-16 10:37:53
jianlongli
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