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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 96孔板种板如何将污染降到最低
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jianggl_2011

木虫 (小有名气)

[交流] 96孔板种板如何将污染降到最低 已有7人参与

作为一只菜鸟，弱弱的问一下：
96孔板种板如何将污染降到最低?可以详细的和我说下种板过程吗?刚开始实验，求稳啊。特别是实验用到的器材，拜托了。
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一命二运三根骨，四积阴功五读书
1楼 2011-08-28 11:16:58
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 2011-08-29 07:38:45
如果你怕染菌的话，可以先将96孔板在紫外灯下灭菌30min，然后在超净台中操作完成你的实验。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-28 19:25:20
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475502411

铜虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+3): good 2011-08-29 07:38:52
一般是将板子泡酸过夜，第二天洗干净后烘干，过夜照紫外使用。如果是时间不允许的话，至少是照紫外2h
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
3楼2011-08-28 22:05:52
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jianggl_2011

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-28 19:25:20:
如果你怕染菌的话，可以先将96孔板在紫外灯下灭菌30min，然后在超净台中操作完成你的实验。。。

我是用排枪种的板，细胞却很不均匀，我很纠结，而且测的OD值偏小，可以解释一下，然后给些建议吗? 谢了啊
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一命二运三根骨，四积阴功五读书
4楼2011-08-29 21:27:55
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★
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4楼: Originally posted by jianggl_2011 at 2011-08-29 21:27:55:
我是用排枪种的板，细胞却很不均匀，我很纠结，而且测的OD值偏小，可以解释一下，然后给些建议吗? 谢了啊

有可能是你操作的问题。细胞为什么很不均匀？
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5楼2011-08-30 10:27:03
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飞雪迷影

金虫 (正式写手)
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dhd997(金币+2): good 2011-08-30 18:52:04
你给细胞换液的时候很可能排枪的枪头接触到板底，触到细胞，导致细胞脱落，所以细胞看上去不是很均匀。
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6楼2011-08-30 10:38:06
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jianggl_2011

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 飞雪迷影 at 2011-08-30 10:38:06:
你给细胞换液的时候很可能排枪的枪头接触到板底，触到细胞，导致细胞脱落，所以细胞看上去不是很均匀。

你这么一说，我好像是那样做了，96孔板种的话，是不是不需要全部的孔都种上？我听说可以周边一圈不种，这样做可以避免OD值偏差吗？
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一命二运三根骨，四积阴功五读书
7楼2011-08-30 21:16:07
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飞雪迷影

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by jianggl_2011 at 2011-08-30 21:16:07:
你这么一说，我好像是那样做了，96孔板种的话，是不是不需要全部的孔都种上？我听说可以周边一圈不种，这样做可以避免OD值偏差吗？

应该不会，如果你觉得那样方便也行，不过重复数尽可能多些，可以更加准确，你在给细胞换液的时候可以把枪头接触到板底部的侧壁，不要直接伸进底下，可以尽量减少对细胞的损伤
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8楼2011-08-31 08:31:47
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liaup

木虫 (小有名气)
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dhd997(金币+5): good 2011-08-31 11:59:10
1，用新买的一次性的板子
2，用repipet,接种细胞，简单，方便。
按以上操作几乎不可能污染
3，接种细胞的密度要合适，96孔板确实存在边缘效应，如果孔有富余的话建议边缘的孔接上细胞，但不用。如果按试验安排，孔较紧张的话，接种细胞后培养的时间稍微延长一点
4，remove 培养液，最好不用枪（有很多不好之处），用真空泵接上毛细管，吸即可
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9楼2011-08-31 08:52:47
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jianggl_2011

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 飞雪迷影 at 2011-08-31 08:31:47:
应该不会，如果你觉得那样方便也行，不过重复数尽可能多些，可以更加准确，你在给细胞换液的时候可以把枪头接触到板底部的侧壁，不要直接伸进底下，可以尽量减少对细胞的损伤

谢谢您的细心指导啊，呵呵，不要闲我啰嗦啊，我还想问一下啊，我是用100毫升培养瓶养的细胞，实验室说是要细胞长到60-70%就可以种板了，这样种的话，孔内细胞应该到百分之多少比较合适啊？
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一命二运三根骨，四积阴功五读书
10楼2011-08-31 21:47:58
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