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gene112

金虫 (文坛精英)

[求助] 植物细胞悬浮培养能否绕过愈伤发生?

如题。植物细胞悬浮培养能否绕过愈伤发生这一阶段,不发生去分化(脱分化),保持原来表现型,就像动物细胞原代培养那样,比如乳鼠心肌细胞原代培养?
请牛人解惑,也欢迎不明真相的虫子们踊跃围观及顶贴。
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equatorxi

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也做植物悬浮细胞系培养,也是用生长7-14天胚轴、子叶用纤维素酶、离析酶去壁制备原生质体,然后悬浮培养
5楼2011-12-11 18:11:41
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liucaifeng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gene112(金币+2): 这个相当于动物的瘤细胞株。还不是我预期的那种植物细胞原代悬浮培养。比较疏松的愈伤组织(第II类愈伤组织),容易分散,据信很容易进行悬浮培养。 2011-08-25 14:53:03
有一种烟草BY2细胞系,就是悬浮培养的细胞系,一代接一代的,不知道是不是你说的这种。
另外想请问一下愈伤组织如何悬浮培养成悬浮细胞?
2楼2011-08-25 14:15:09
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zouhongda

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4): 鼓励应助 2011-08-25 19:26:39
gene112(金币+2): 多谢应助。 2011-08-25 19:48:28
II型例愈伤为胚性愈伤,松散,在其进行悬浮培养时,需要用果胶酶和纤维素酶去细胞壁后才能进行。烟草BY2细胞系是做为植物的一种悬浮培养的模式而存在的。做悬浮培养还是要看你的目的。如果是悬浮培养生产次生代谢产物的可以这样。不过之前再做完悬浮培养使其大量扩繁之后,还要分化成苗什么的,就要又回到半固体或者固体培养基上来,不过此时最大的困难就是,悬浮培养获得的细胞一般都是无细胞壁的,而转移到半固体和固体培养基上还能生长的关键就是能够恢复细胞壁的生长,此时我们一般都会多加入些肌醇。
3楼2011-08-25 16:38:45
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zouhongda

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-08-25 19:26:48
gene112(金币+2): 多些应助。 2011-08-25 19:48:41
刚才说的是愈伤的悬浮培养。你所说的情况也有,但我了解的一般都是取植物组织后,如叶片,用果胶酶,纤维素酶处理,去壁,形成原生质体,之后可以转一些你感兴趣的基因进去,做的是瞬时表达。
4楼2011-08-25 16:41:36
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