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liuyuncun

金虫 (小有名气)

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[求助] 求高手指点我们的ELISA实验如何设置空白和阴性及如何计算P/N

背景：我用ELISA检测水产品消化组织中的一种抗原，基本步骤如下，将水产品内脏团放入PBS中均质后离心，上清稀释一定倍数后包板，加入买的单抗和酶标二抗，加TMB测OD值，

请问高人我如何设置空白和阴性呢？怎么样计算确定阳性呢？
ps：我是这样设置的，空白是用PBS包板，其他的条件都一样；阴性是不加入单抗，用PBS代替，其他的条件都一样。这是参考的外文文献，请高人给看看这样设置行不行？谢谢了！！
现在我不知道怎么来计算确定阳性的条件，一般是用P/N值，我的N值应该用哪个呢？现在的关键是我不太明白空白值和阴性值的作用。
下面的表格是我最近一次的结果
只把含有抗原的上清液稀释了不同的倍数，其他的条件相同。请高人看看有什么问题。谢谢了

空白       0.087       0.068       0.072

      10倍       20倍       40倍       80倍       100倍
阴性0.144       0.126       0.13       0.132       0.113
      0.134       0.159       0.123       0.14       0.094
      0.142       0.153       0.153       0.13
阳性0.495       0.339       0.321       0.362       0.411
      0.58       0.402       0.45       0.364       0.416
      0.43       0.506       0.303       0.303

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