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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » C18柱子堵了（详见内容）
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ccs411

木虫 (正式写手)

[求助] C18柱子堵了（详见内容）

情况是这样的：我要分离的核苷酸，但是含有水解的酶，使用C18柱（2.7μm，4.6*50mm，预装柱）分离，进过几针样后（样品用0.22的膜过滤过的），柱压不断上升（每次用时，柱压都比前一次升高），但是，流动相和流速每次都一样。现在，在不上样时，0.1ml流速的柱压达到80bar左右。请厂家来看了，说是柱子被蛋白堵了。
请教给位前辈，有什么好的方法解决赌柱问题？另外，在上C18柱子前，还有什么好的办法把蛋白去除，而不会影响我的核苷酸？
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1楼 2011-08-23 15:41:42
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freebcw

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 谢谢应助回帖~ 2011-08-23 18:55:15
ccs411(金币+5): 谢谢 2011-08-23 21:42:12
ccs411(金币+2): 2011-09-15 12:21:58
1.蛋白质属于强极性物质，进入色谱柱内被强力吸附，一般被蛋白堵了的话柱子就废了，也可以死马当活马医，找一种强极性溶剂冲洗，看能不能冲洗掉。
2.进样前去除蛋白一般可以采用离心或者蛋白质变性的方法，也可以两者结合。
祝你成功！！！
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苦海无涯，药为人先
2楼2011-08-23 16:04:12
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totoyoyo1997

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

ccs411(金币+2): 2011-08-25 12:22:05
ccs411(金币+1): 2011-09-15 12:22:03
最好是试用前了解化合物的结构特性，根据要求选择合适的柱子。
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3楼2011-08-25 09:51:57
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