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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于RNA提取过程中的问题
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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

[交流] 关于RNA提取过程中的问题

各位小弟用试剂盒第一次提取RNA的时候出来结果了，后来再提就没有结果了，不知道是什么原因啊。一开始用的柱式试剂盒。里面的无Rnase的离心管用完了。我又换的Axygen的盒装离心管，离心管是在自封袋里装着的外面有个纸盒标着无Rnase等。我想问一下自封袋开口后对剩余的离心管有影响吗，我老担心会污染，用紫外线照射能灭火Rnase吗？因为里面的离心管全都是开着盖的。别的东西枪头都是盒装的，怎么提不出来啊。
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1楼 2011-08-19 09:46:49
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fangni

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
zqt123_1981(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+2): 其实手套不换也ok，手指不要乱碰东西就好啦 2011-08-19 18:42:44
是不是RNA给降解了呀，我们提的时候没买盒子，用的Trizol法，效果还可以，其它都是用DEPC水浸泡后灭菌用的，不过提取的过程中要求勤换手套，戴口罩，尽量不说话，有时候实验室人太多也可能有影响
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3楼2011-08-19 15:15:55
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
zqt123_1981(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+2): 鼓励,还没转正啊？ 2011-08-19 12:07:57
开口后也没关系，只要放好，不让灰尘落里面就好。拿出来的时候小心倒出来，戴手套，尽量不要接触其他管子。
紫外应该不行，不然也不会用到DEPC这么毒的东西了。提不出来原因很多，但直接用Rnase的耗材的话，这方面应该不是原因。考虑下改进提取步骤吧。
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2楼2011-08-19 10:11:49
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wzqno

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
zqt123_1981(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+2): Good！我以前也是在通风橱，后面熟练了就在外面找个角落做了。 2011-08-19 18:43:37
我提RNA的时候也没用试剂盒，就买了DEPC和trizol，所有的枪尖和EP管都用0.1%DEPC水过夜浸泡，然后高温灭菌（普通灭菌都不行，紫外照射估计更不行），提的时候在通风橱里操作的。你最好把所有的枪尖管子，再好好消毒一下吧
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4楼2011-08-19 15:33:04
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