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为什么提取的DNA总是降解？已有27人参与
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各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正常。实验室几个人提取都是这样，不知道是什么原因，所用的试剂已经重新配过，还是这个结果。请问有没有遇到过类似情况的，这是什么原因，怎么解决呢？请大家指点帮助~  |
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adslye
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大量絮状？看你凝胶条带不亮额。溶得很稀？ 我做植物的，当我出现大量絮状都是因为多糖。gDNA一开始不会出现很多。动物我不知道会有哪些干扰物质。 另外，看silicare的提醒。我重看了你的胶。首先两块胶都不亮，尤其是下面的，marker都不亮。EB是不是加少了，还是胶放久了。 你marker是多少的。感觉你的条带都是隐约的两条。这样的话有可能是降解不完全的RNA。RNA18S大约1900，28s大约4700。你自己对照下。而这样有可能就是用错酚了。） 只能帮你分析这么多了。不过楼上有位建议不错：用新买试剂盒，能提出，说明现有试剂有问题（要不用错，要不过期）。不能提出，那就是样品在组织里已经降解。 [ Last edited by adslye on 2011-8-19 at 10:13 ] |
21楼2011-08-19 09:21:37
silicare
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