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lsx08

新虫 (初入文坛)

[求助] RP-HPLC分离蛋白质

我现在在做用RP-HPLC分离蛋白质,分离效果一直不理想(见谱图),已尝试多种流动相,结果是目标峰与前面的杂峰分离不开,达不到基线分离,希望各位高手可以指导一下,十分谢谢!色谱条件:C18色谱柱(4.6×250mm,300A);流动相是0.1%三氟乙酸水和0.1%三氟乙酸乙腈;检测波长228nm,采用梯度洗脱。
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labrat

木虫 (著名写手)

Better solution is to change column to SEC column, else can try this combination for hydrophobic protein:
Buffer A: water, 50% formic acid
Buffer B: isopropanol, 5% formic acid
Gradient: 0-100% A to B

some use acetonitrile, you can try combination.

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7楼2011-09-02 17:16:16
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