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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SSR-PCR求助
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passingby

铜虫 (小有名气)

[交流] SSR-PCR求助 已有16人参与

本人开始做SSR标记不久，但总是做不出让人满意的结果来，不是PCR出了问题，就是跑胶出问题，版里谁做过SSR标记的给我支个招，看看我做的聚丙烯酰胺凝胶电泳问题出在哪里，给点参考建议，我下面该如何优化是好
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不能再走一步算一步了，我要计划好每一步该怎么走，起码要做到心中有数！
1楼 2011-08-14 22:38:12
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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-05-25 21:41:31
加入APS和TEMED后不要急于灌胶，要先充分摇匀，灌入板中就不易再混匀了，因胶成分不均匀导致不同点样孔条带位置出现偏差。做试验不能按照步骤赶，而要稳重有信心。从条带清晰程度大部分样品看还算不错，说明PCR体系程序可以，一些没出的条带可能是因为PCR环节你的操作失误导致某药品未加入或者总DNA本身含量不达标。另外如果灌胶时出现气泡等问题应在点样时将影响的点样孔错开，避免影响结果
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被迫的无知小小博
22楼2013-05-25 01:03:23
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liugs

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
2楼2011-08-15 08:21:30
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marker61613

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
在倒胶过程中有气泡没有及时赶跑 ；样品量浓度似乎不一，导致最后银染完后有些条带看不清，或许是压根扩不出条带，2者中的哪一个原因，从图中不能客观得出。
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3楼2011-08-15 13:33:29
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ezrazh

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看图片还可以，最好是说出具体的问题才好。好多问题在你实验技能熟练以后就没有了。
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4楼2011-08-15 16:22:52
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