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passingby

铜虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 14.5
红花: 2
帖子: 100
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虫号: 1292193
注册: 2011-05-11
专业: 遗传学与生物信息学

[交流] SSR-PCR求助已有16人参与

本人开始做SSR标记不久，但总是做不出让人满意的结果来，不是PCR出了问题，就是跑胶出问题，版里谁做过SSR标记的给我支个招，看看我做的聚丙烯酰胺凝胶电泳问题出在哪里，给点参考建议，我下面该如何优化是好

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三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

不能再走一步算一步了，我要计划好每一步该怎么走，起码要做到心中有数！

1楼2011-08-14 22:38:12

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kidluag

金虫 (正式写手)

不自信的师生

应助: 7 (幼儿园)
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散金: 45
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在线: 38.1小时
虫号: 1633228
注册: 2012-02-22
性别: MM
专业: 蔬菜学与瓜果学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-05-25 21:41:31

加入APS和TEMED后不要急于灌胶，要先充分摇匀，灌入板中就不易再混匀了，因胶成分不均匀导致不同点样孔条带位置出现偏差。做试验不能按照步骤赶，而要稳重有信心。从条带清晰程度大部分样品看还算不错，说明PCR体系程序可以，一些没出的条带可能是因为PCR环节你的操作失误导致某药品未加入或者总DNA本身含量不达标。另外如果灌胶时出现气泡等问题应在点样时将影响的点样孔错开，避免影响结果