| 查看: 2659 | 回复: 21 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
SSR-PCR求助 已有16人参与
|
|||
本人开始做SSR标记不久，但总是做不出让人满意的结果来，不是PCR出了问题，就是跑胶出问题，版里谁做过SSR标记的给我支个招，看看我做的聚丙烯酰胺凝胶电泳问题出在哪里，给点参考建议，我下面该如何优化是好 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有292人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
kidluag
金虫 (正式写手)
不自信的师生
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 1044.5
- 散金: 45
- 红花: 10
- 帖子: 482
- 在线: 38.1小时
- 虫号: 1633228
- 注册: 2012-02-22
- 性别: MM
- 专业: 蔬菜学与瓜果学
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+2): 鼓励积极交流哦 2012-02-22 08:20:04
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小丹木木(金币+2): 鼓励积极交流哦 2012-02-22 08:20:04
|
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带 与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。其次，是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源的酶则不出现，酶的量过多有时也会出现非特异性扩增。其对策）有：①必要时，重新设计引物。②减低酶的量或调换另一来源的酶。③降低引物量，适当增加模板量，减少循环次数。④适当提高退火温度或采用二温度点法(93℃变性，65℃左右退火与延伸，也叫两步法)。 PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶的量过大或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶的量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓 度。④增加模板量，减少循环次数 |
17楼2012-02-22 04:30:37
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
|
本帖内容被屏蔽 |
2楼2011-08-15 08:21:30
3楼2011-08-15 13:33:29
ezrazh
木虫 (著名写手)
- 应助: 136 (高中生)
- 金币: 3548.1
- 散金: 50
- 红花: 20
- 帖子: 1008
- 在线: 339小时
- 虫号: 699998
- 注册: 2009-02-12
- 性别: GG
- 专业: 生物地球化学
4楼2011-08-15 16:22:52