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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » 【求助】为什么70%乙醇在液相中会有这么多峰？
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陈露

银虫 (小有名气)

[求助] 【求助】为什么70%乙醇在液相中会有这么多峰？

各位虫友麻烦帮我解答一下，我做的是液相指纹图谱，流动相为乙腈-0.2%磷酸，梯度洗脱，乙腈比例从10%变化到100%，采集时间60min。检测波长为215nm。提取药材的溶剂为70%乙醇回流提取。今天进了一针70%乙醇，出现了这么多峰，请有经验的虫友解答一下，谢谢！现附上色谱图一张，其中2、3、4、5为流动相出的峰，在此也想问一下，怎么流动相也会出峰呀（之前有进过空针）？其余为70%乙醇出的峰。本人现在是极度郁闷了
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1楼 2011-08-14 13:16:15
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陈露

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tcollar at 2011-08-14 13:34:01:
你的乙腈，磷酸，乙醇，以及水（你提到70%乙醇，我假定你用的是乙醇水溶液，含30%的水）都是HPLC级或者色谱级的吗？如果不是，里面带些杂质就很正常了，尤其是磷酸（一般分析纯为85%水溶液）。看你的色谱图里面， ...

提取溶剂好像一般都用的是分析纯的吧，如果用色谱基的乙醇太奢侈了吧，乙腈是HPLC级的，水是哇哈哈纯净水，磷酸是分析纯的，都用0.45μ的滤膜过滤过。那这样说起来，我根本就没提出多少峰嘛，sweat:
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4楼2011-08-14 13:42:48
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2110940090

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 陈露 at 2011-08-14 13:16:15:
各位虫友麻烦帮我解答一下，我做的是液相指纹图谱，流动相为乙腈-0.2%磷酸，梯度洗脱，乙腈比例从10%变化到100%，采集时间60min。检测波长为215nm。提取药材的溶剂为70%乙醇回流提取。今天进了一针70%乙醇，出现了 ...

图在哪啊？都没看到图
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2楼2011-08-14 13:26:20
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tcollar

木虫 (小有名气)

水上漂

【答案】应助回帖

陈露(金币+10, 博学EPI+1): 2011-08-14 14:31:13
你的乙腈，磷酸，乙醇，以及水（你提到70%乙醇，我假定你用的是乙醇水溶液，含30%的水）都是HPLC级或者色谱级的吗？如果不是，里面带些杂质就很正常了，尤其是磷酸（一般分析纯为85%水溶液）。看你的色谱图里面，很多杂质峰都在0.02AU以上，峰7竟然达到0.16AU，足以造成误分析，说明其中一个或几个溶剂完全不合格，不能用作HPLC。

弄到一些HPLC级的溶剂，你可以依次将上述四种溶剂依次进样，然后一一确定杂质峰的来源。
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3楼2011-08-14 13:34:01
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tcollar

木虫 (小有名气)

水上漂
娃哈哈纯净水

去生物系实验室搞一些双蒸水，不会很难吧？肯定比娃哈哈强!那玩意就是过滤后的自来水。还有分析纯磷酸里面杂质太多了。一定要色谱纯的。

用不起色谱纯的乙醇提取，有其他办法。比如在同样的条件下，用色谱纯的乙醇-水作微量提取，专门为HPLC制样，容剂量几毫升就够了。
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5楼2011-08-14 23:39:43
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